流式细胞仪检测CD147蛋白的方法,步骤越具体越好,从来没做过,先谢谢各位了,帮帮忙
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/04 03:28:28
流式细胞仪检测CD147蛋白的方法,步骤越具体越好,从来没做过,先谢谢各位了,帮帮忙
1. 细胞分为2组.
2. 购买CD147的特异性抗体,和另外一个同型,非特异性抗体.比如抗CD147是IgG,那就买一个非同一的IgG.
3. 按照厂家推荐的浓度和时间染细胞,包括二抗
4. 先用非特异抗体染色的那个细胞调机器,设置阴性阈值.
5.在测量用特异性抗体染色的那个,得到阈值上计数
再问: 十分感谢,我检测的是小鼠细胞的CD147,抗体如果用FITC标记的兔抗小鼠CD147抗体,同型对照用FITC标记的兔抗小鼠IgG,对吗?这样是不是就不用二抗了呀?用到的PBS是含0.5%BSA的吗?
再答: 不对。如果使用FITC标记的兔抗小鼠CD147,那同型对照就用FITC标记的兔IgG,非特异性,不能抗小鼠。 PBS的浓度没问题。
2. 购买CD147的特异性抗体,和另外一个同型,非特异性抗体.比如抗CD147是IgG,那就买一个非同一的IgG.
3. 按照厂家推荐的浓度和时间染细胞,包括二抗
4. 先用非特异抗体染色的那个细胞调机器,设置阴性阈值.
5.在测量用特异性抗体染色的那个,得到阈值上计数
再问: 十分感谢,我检测的是小鼠细胞的CD147,抗体如果用FITC标记的兔抗小鼠CD147抗体,同型对照用FITC标记的兔抗小鼠IgG,对吗?这样是不是就不用二抗了呀?用到的PBS是含0.5%BSA的吗?
再答: 不对。如果使用FITC标记的兔抗小鼠CD147,那同型对照就用FITC标记的兔IgG,非特异性,不能抗小鼠。 PBS的浓度没问题。
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