小鼠肝组织石蜡切片具体怎么做?
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/09/28 09:21:37
小鼠肝组织石蜡切片具体怎么做?
取新鲜肝脏时要甲醛灌注吗?取出后应该如何处置?切肝组织块时有何讲究?
取新鲜肝脏时要甲醛灌注吗?取出后应该如何处置?切肝组织块时有何讲究?
一般来说是要的,但也要根据具体实验要求决定(比如你要观察一些什么东西啦,对结构的完整性要求有多高啦)甲醛能固定一般组织,但溶解肝糖和色素.
注意:1.材料必须新鲜,搁置时间过久则产生蛋白质分解变性,导致细胞自溶及细菌的滋生,而不能反映组织活体时的形态结构.
2.固定液的种类很多,其对组织的硬化收缩程度以及组织内蛋白质、脂肪、糖类等物质的作用各不相同.例如纯酒精可固定肝糖而能溶解脂肪,甲醛能固定一般组织,但溶解肝糖和色素.固定液可分为单一固定液及混合固定液.前者有甲醛(蚁醛、福尔马林)、酒精、醋酸或冰醋酸、升汞、锇酸(四氧化锇)、重铬酸钾及苦味酸等,单一固定液不能固定细胞中的所有成分;混合固定液可以互补不足,常用的混合固定液有Bouin氏液、Zenker氏液、FAA液、Carnoy氏液、SuSa液(配方见有关技术书籍).
1.取材
2.固定
3.洗涤与脱水
4.透明
5.浸蜡与包埋
6.切片
7.贴片与烤片
8.切片脱蜡及水化
9.染色
10.切片脱水、透明和封片
切片刀的锐利与否、蜡块硬度适当都直接影响切片质量,可用热水或冷水等方法适当改变蜡块硬度.通常切片厚度为4~7微米,切出一片接一片的蜡带,用毛笔轻托轻放在纸上.
注意:1.材料必须新鲜,搁置时间过久则产生蛋白质分解变性,导致细胞自溶及细菌的滋生,而不能反映组织活体时的形态结构.
2.固定液的种类很多,其对组织的硬化收缩程度以及组织内蛋白质、脂肪、糖类等物质的作用各不相同.例如纯酒精可固定肝糖而能溶解脂肪,甲醛能固定一般组织,但溶解肝糖和色素.固定液可分为单一固定液及混合固定液.前者有甲醛(蚁醛、福尔马林)、酒精、醋酸或冰醋酸、升汞、锇酸(四氧化锇)、重铬酸钾及苦味酸等,单一固定液不能固定细胞中的所有成分;混合固定液可以互补不足,常用的混合固定液有Bouin氏液、Zenker氏液、FAA液、Carnoy氏液、SuSa液(配方见有关技术书籍).
1.取材
2.固定
3.洗涤与脱水
4.透明
5.浸蜡与包埋
6.切片
7.贴片与烤片
8.切片脱蜡及水化
9.染色
10.切片脱水、透明和封片
切片刀的锐利与否、蜡块硬度适当都直接影响切片质量,可用热水或冷水等方法适当改变蜡块硬度.通常切片厚度为4~7微米,切出一片接一片的蜡带,用毛笔轻托轻放在纸上.
小鼠肝组织石蜡切片具体怎么做?
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