荧光定量PCR熔解曲线

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/10 15:29:14

荧光定量PCR熔解曲线
本人菜鸟,刚接触荧光定量PCR,有一个问题,不知道溶解曲线中为什么有那么多线,每条线是不是代表一个循环?如果是的话为什么同时扩增的两个基因,内参基因溶解曲线图上面线条少,目的基因上面的线条多?

溶解曲线是在正常的PCR反应基础上加一个溶解曲线的反应条件,其中当温度由60℃升至95℃时,PCR仪每隔一定的温度检测一次信号.最后将收集的信号绘制出溶解曲线,然后将溶解曲线一次微分就会得到我们平时看到的峰性图.每一条线代表着某个孔里的反应体系里产物的单一情况,某一条线如果为单峰且在一定合理的温度范围内（一般为80~90℃）则认为正常,如果为双峰则可能有非特异性扩增.由此可以判断产物是否为目的基因且是否单一.内参有内参的线,目的基因有目的基因的线,同一条线不会出现两个基因的峰.你可以看一下溶解曲线的横、纵坐标.

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