测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白?
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/09/22 11:42:19
测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白?
小弟最近在用福林酚法测大曲中酸性蛋白酶活力,但用PH3.0乳酸-乳酸钠缓冲液配制1%酸性酪蛋白时,在沸水浴中始终不能完全溶解,在底部总有絮状沉淀.用该蛋白溶液进行水解后和空白液(1ml酶液+1ml三氯乙酸+所配1%酸性酪蛋白)在相同条件下离心显色,都显蓝色,在680nm条件下测吸光度也只有0.039,不在要求的0.2到0.4的范围之内.望各位大侠赐教.
小弟最近在用福林酚法测大曲中酸性蛋白酶活力,但用PH3.0乳酸-乳酸钠缓冲液配制1%酸性酪蛋白时,在沸水浴中始终不能完全溶解,在底部总有絮状沉淀.用该蛋白溶液进行水解后和空白液(1ml酶液+1ml三氯乙酸+所配1%酸性酪蛋白)在相同条件下离心显色,都显蓝色,在680nm条件下测吸光度也只有0.039,不在要求的0.2到0.4的范围之内.望各位大侠赐教.
我上学的时候做过这个实验,而且是我硕士论文的实验.
当时和你一样,怎么都溶解不完全,很抓头.
后来发现,为什么要让酪蛋白溶解完全呢?蛋白酶测定只要最后有酪蛋白被酶分解就可以显色了啊,溶解多少用多少呗.
于是,按照实验方法溶解了一些酪蛋白,然后离心,取上清做实验.结果很好.
不知道咱俩的情况是不是一样,参考一下吧
补充一下,你的最后OD是不是以三氯乙酸的做空白的?那么OD低有两种可能,第一,你测的酶确实不行,酶活太低;二,你的样品不纯,里边含有酪氨酸.我当时就遇到过第二种情况,导致OD极低
当时和你一样,怎么都溶解不完全,很抓头.
后来发现,为什么要让酪蛋白溶解完全呢?蛋白酶测定只要最后有酪蛋白被酶分解就可以显色了啊,溶解多少用多少呗.
于是,按照实验方法溶解了一些酪蛋白,然后离心,取上清做实验.结果很好.
不知道咱俩的情况是不是一样,参考一下吧
补充一下,你的最后OD是不是以三氯乙酸的做空白的?那么OD低有两种可能,第一,你测的酶确实不行,酶活太低;二,你的样品不纯,里边含有酪氨酸.我当时就遇到过第二种情况,导致OD极低
测酸性蛋白酶时如何溶解酪蛋白?
我要测蛋白酶的活性,文献上说用酪蛋白做底物
为什么验证猪笼草分泌液中有蛋白酶时,用蛋白块而不是蛋白液
酸性蛋白酶的提取方案?
请问怎么溶解酪蛋白请问下高手,能用小苏打溶解酷蛋白吗?还是有其它的办法溶解?
用福林酚法测定蛋白酶活性时,所用的酪蛋白哪里可以买?用干酪素(用于微生物培养基)可以吗?
蛋白酶K可以用来消化那些蛋白?
称取25mg蛋白酶配成25ml溶液,取2ml测得含蛋白氮0,2mg,另取0.1ml 测酶活力,结果每小时可以水解酪蛋白产
酸性水解酪蛋白的英文缩写是什么
福林酚法测蛋白我现在想测固定化木瓜蛋白酶的活性,底物是酪蛋白.原来溶解酪蛋白的缓冲液是磷酸缓冲液,但是这个缓冲液里的成分
为什么尿素可以溶解蛋白
酸性蛋白酶,酸性纤维素酶产品的特性,使用方法是什么,