DNA胶回收电泳有目的条带,但是测OD值时去测不出来?请问这究竟是什么原因?

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/10 08:50:57

DNA胶回收电泳有目的条带,但是测OD值时去测不出来?请问这究竟是什么原因?
菌落PCR之后进行胶回收的!亮的两条带是回收之前,其他都是回收之后电泳结果.

一般Marker中亮的条带是100ng,其他的条带是50ng.可以看到你回收之后的条带亮度估计在10ng~30ng左右,如果你的上样体积为10ul,则浓度应该是1ng~3ng/ul,这个浓度是很低的,一般的分光光度计都是测量不出的.
如果做克隆,可以不用管OD值.还有你的胶回收效率有点低,这个是问题关键.
再问：非常感谢您！但是如果测序这个浓度肯定是不行的吧，回收率太低怎么办？提高电泳上样量还是怎么办？
再答：测序是可以提供质粒的，菌液也可以，你提供上下游引物就可以了。你直接把菌落PCR阳性的克隆取扩大培养，直接送去测序，可以绕过胶回收这一步。
再问：我是想直接菌落pcr之后胶回收送公司测序，没有做克隆
再答：你现在不是浓度低嘛，你把菌落PCR还剩余的菌液接种到LB培养基扩大培养，然后把你做菌落PCR的引物和培养好的菌液送去测序不就可以了。
再问：谢谢！这确实可以，但是我的样本很多，这样是不是很麻烦，费用是不是也要高些？有没有办法可以让回收率提高？
再答：我都是直接送菌液测序的，一般也都这么测吧，倒是很少听说酶切回收测序的。而且摇菌要比酶切回收简单吧，节省了内切酶的费用，测序送质粒和片段应该都是一样的价格。你实在想这么做，可以直接PCR了拿去测序，不用回收。至于增加回收效率，这个如果你完全按照说明书上做的话还不行，那就得换试剂盒。

DNA胶回收电泳有目的条带,但是测OD值时去测不出来?请问这究竟是什么原因? 关于DNA回收问题我已经跑完电泳,是用来测序的DNA.但是我不知道要回收哪条带的DNA,本来教授说做完再讨论回收哪条带的 dna有od值但是凝胶成像无条带是怎么回事? 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? 变性PAGE电泳后的DNA能够切胶回收做测序吗?比如DGGE后的DNA条带. PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. 我提取的DNA电泳后,条带很暗,而自外检测OD值在正常范围内,上样量为2ul,请问为什么 DNA电泳没有图像昨天使用CTAB法提取植物的DNA,提取过程中能看到沉淀,但是稀释溶解后,电泳看不到任何条带,而且电泳 PCR电泳目的条带很浅做双酶切时,有没有人出现胶回收的DNA产物与酶切缓冲液混合温浴后跑不出条带的现象? 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀 PCR有扩出来条带,但目的条带不是太亮就有什么原因