我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗?

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：综合作业时间：2024/11/10 17:54:50

我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗?
我可不可以在起始密码子前面的一段序列中设计引物?我以前是这样设计的,但是一直都扩不出来,怎么办?

如果只想做序列的克隆,那么引物往两端延伸没问题.
如果要做蛋白表达的话起始端必须是起始密码子.引物不可以在起始密码子之前,否则影响表达起始.
扩不出来的话,首先分析一下序列,是否GC含量较高.
然后尝试一下延长引物序列,用软件分析一下两引物的互补性,防止形成引物二聚体.
再然后就是做一下温度梯度,用好一点的酶等等.
再问：我的上游引物加了酶切位点后有6对碱基自身互补，影响大吗？两引物的互补性达到多少才会形成引物二聚体？
再答：其实有互补没关系，引物互相匹配也没关系。最关键的是引物的3'末端最后一个碱基不能匹配，否则引物相互延伸就不再能够匹配你的序列了。

我想扩增某一目的基因,请问引物一定要在起始密码子和终止密码子周围设计吗? 基因指导蛋白质合成时翻译时候一定有起始密码子和终止密码子吗请问高中阶段在一条肽链上碱基的计算需要考虑到起始密码子和终止密码子吗? 起始密码子和终止密码子都对应氨基酸么? 起始密码子终止密码子都能翻译出氨基酸吗 his-tag 我的目的基因连在PET28载体上,设计引物时我把基因的终止密码子去掉,这样俩边的HIS-TAG都表达了, 英语翻译若第一个起始密码子突变成终止密码子,这段基因还能翻译吗求生物强人关于复制原点,标记基因,启动子,终止子与启动密码子终止密码子和目的基因的详细关系基因在染色体上呈线性排列,基因的前端有起始密码子,末端有终止密码子,这句话为什么是错的?又不是最前端关于引物和目的基因的关系.针对某基因设计的同一对引物在不同人的基因组中扩增的片段一定一样吗翻译蛋白质的过程中起始密码子和终止密码子哪个不参加翻译? 当扩增的DNA用于表达时,并且本身没有启动子,那么设计引物时,5‘端增加的酶切位点中必须要有起始密码子