未知基因克隆与表达的研究途径
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/09/20 08:34:37
未知基因克隆与表达的研究途径
已找到同源基因,请说出大概步骤。
已找到同源基因,请说出大概步骤。
看来是要研究的物种没有测序咯
首先根据同源基因比对,然后在保守区域设计间并引物,先将保守区域克隆.然后根据保守区域设计基因特异引物,进行5’RACE及3’RACE,分别拿到保守区域两端的片断,然后序列拼接,拼出全长序列后,在基因两端设计一对引物将基因全长CDS克隆.
表达策略:1 反向遗传学:克隆的CDS可以亚克隆到特定的表达载体,并转基因到特定的物种(如果本物种的转基因体系尚未建立或很困难,可以先转入一些模式生物),按需要在各种启动子的驱动下在生物体内表达,观察表型;同时可以根据该CDS序列,设计RNAi载体,转基因,观察表型.如果需要,可以克隆该基因本身的启动子,然后让其驱动该基因或RNAi片断表达.
2 体外表达:可以利用大肠杆菌、酵母系统,在体外做一些原核或真核的表达.用以研究酶活,制备抗体等.
首先根据同源基因比对,然后在保守区域设计间并引物,先将保守区域克隆.然后根据保守区域设计基因特异引物,进行5’RACE及3’RACE,分别拿到保守区域两端的片断,然后序列拼接,拼出全长序列后,在基因两端设计一对引物将基因全长CDS克隆.
表达策略:1 反向遗传学:克隆的CDS可以亚克隆到特定的表达载体,并转基因到特定的物种(如果本物种的转基因体系尚未建立或很困难,可以先转入一些模式生物),按需要在各种启动子的驱动下在生物体内表达,观察表型;同时可以根据该CDS序列,设计RNAi载体,转基因,观察表型.如果需要,可以克隆该基因本身的启动子,然后让其驱动该基因或RNAi片断表达.
2 体外表达:可以利用大肠杆菌、酵母系统,在体外做一些原核或真核的表达.用以研究酶活,制备抗体等.
未知基因克隆与表达的研究途径
克隆未知基因的方法有哪些?
如何研究一个未知基因的功能?
你克隆过未知的基因吧?我也要克隆一个未知基因.我有以下疑问:1,我克隆鱼的一个未知基因.
获得一个功能未知的基因克隆后,怎样才能阐明该基因的功能?根据某种真核生物提出具体的研究方案.
克隆一个未知的基因拿到序列需要多久?
你克隆过未知的基因吧?我也要克隆一个未知基因.我有以下疑问:1,我克隆鱼的一个未知基因.我该找多少生物的该基因来比对找保
分别举例说明细胞工程的那些技术可以为基因克隆与功能研究、分子辅助育种、转基因研究提供平台
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基因克隆的步骤
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我要克隆表达一段基因,