菌落PCR的TM值和P基因的是不是一样啊

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：综合作业时间：2024/11/11 00:44:12

菌落PCR的TM值和P基因的是不是一样啊
连接的是T载体菌落PCR 条带很暗有杂带也不亮是不是要提高菌落PCR的TM值啊?

菌落PCR建议,对菌落进行预变性处理,将挑取的单克隆溶于10ul无菌水（1半保存）,分5ul出来进行95度10min变性然后直接放冰上进行预变性处理,相当于提高模板量,提高产量.
　　有杂带,建议提高TM值或降低Mg离子浓度.
再问：菌落PCR的TM值和P基因的TM值可能出现不一样的情况是吗？就是说用P基因的TM值来菌落PCR也会P不出目的条带是吧？
再答：这个也不是，主要是菌落PCR的条件更为苛刻，同样的条件在扩增基因时可以，但菌落PCR时条件可能需要进一步优化。

菌落PCR的TM值和P基因的是不是一样啊大肠杆菌转化后做菌落pcr一直p不出带是怎么回事?麻烦高手指教下pcr体系及反应时的程序,目的基因大概1000bp 菌落pcr是否可以直接扩增基因组上的目的基因?单菌落需要特殊处理吗普通的RT-PCR 和荧光定量PCR,在反转录这一步是不是一样的? 引物分哪几种?扩基因所用的引物和做RT-PCR的引物一样吗? 在做RT-PCR时,或者是一般的PCR时,退火温度怎么设置,退火温度和Tm值之间有怎么样的关系? 同一模版DNA在进行PCR扩增时是不是需要不同的两种引物?为什么资料上说引物只要Tm值相似就行? PCR中两个引物的Tm值相差太大有什么害处? 如果从primer5中得到引物的tm 值怎么确定pcr温度实时PCR产物的Tm值为什么一般是在80以上? 普通PCR和基因克隆PCR的引物设计有什么不同和注意事项? 单菌落菌液PCR检测请问转化的单菌落如何用菌液PCR检测?