带酶切位点的引物设计时计算Tm值,退火温度及GC含量时是否要把酶切位点和保护碱基计算在内?我觉得不用,因为酶切位点可以不

带酶切位点的引物设计时计算Tm值,退火温度及GC含量时是否要把酶切位点和保护碱基计算在内?我觉得不用,因为酶切位点可以不 引物的长度包括酶切位点在内么?计算Tm值以及计算GC含量时用算酶切位点的么? pcr 一段2000多bp的基因 引物设计时 条件怎么设 包括引物长度 gc含量等 因为我用软件设计时总是设不出来 可以 为什么做PCR设定引物退火温度时设定的退火温度要比合成引物得到的引物Tm值低几度? 为什么pcr 引物设计出来,下游引物加上酶切位点和保护碱基后,有一个Tm值是负值呀? 引物的退火温度如何计算,用tm值减去5度,靠谱不?用1m na+的还是50mmna+? 退火温度与引物的TM值有什么联系?为什么退火温度要比TM低5度左右最合适? 请教如何计算引物的Tm值? 引物的TM值如何计算 如何计算引物的Tm值? TAILPCR 反应体系中退火温度一般是多少 和特异引物的TM值有什么关系吗 我做引物特异性扩增,引物上的TM值是61.9度,我把退火温度从55度降到51度,隔一度试一次,二聚体还是有呢