为什么我做定量PCR无CT值（信号）出现?怎么解决呢

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/09/22 04:19:41

博凌科为-为你1.反应循环数不够.一般都要在35个循环以上,可根据实验情况增加循环（如至45cycles）,但高于45个循环会增加过多的背景信号.2.检测荧光信号的步骤有误.一般SG法采用72℃延伸时采集,Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号.3.引物或探针降解.可通过PAGE电泳检测其完整性.4.引物或探针的设计,如探针高于引物的温度不够,造成探针未杂交上而产物已延伸的情况.5.模板量不足.对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起.6.模板降解.避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况.

为什么我做定量PCR无CT值（信号）出现?怎么解决呢定量PCR为什么有的孔没有检测到Ct值? 各位同仁,我做的SYBR GREEN实时定量PCR,怎么阴性对照总是出来Ct值呢,我的阴性对照是用灭菌水做模板的我做荧光定量pcr taqman 探针,标准曲线不好,ct值没有按等差数列增加,怎么办? 定量PCR知道Ct值那么△Ct 2-△△CT 及标准差怎么算的请问我在做荧光定量pcr的时候内参的ct值很低大约在35左右,而目的基因ct值在25左右定量pcr CT请问做荧光定量PCR时,CT值的结果在30左右,而不是20-25之间,这样的结果可信吗请问：做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么? 荧光定量PCR检测时的CT值怎么确定的我做荧光定量PCR标准曲线时,斜率只有-1.25,扩增效率E很高.为什么呢? 实时定量PCR实验怎么做我要用CT法做荧光定量PCR,请问需要做标准曲线吗?关于浓度,是不是在反转录时将RNA浓度调一致?