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免疫荧光 定位今天考研,考一道免疫荧光的问题,叫我说出一种实例我是这样回答的：比如想知道一种蛋白质在细胞内的定位,可以用

来源：学生作业帮 编辑：神马作文网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/11/10 17:49:31
免疫荧光 定位
今天考研,考一道免疫荧光的问题,叫我说出一种实例
我是这样回答的：比如想知道一种蛋白质在细胞内的定位,可以用一这种蛋白质为抗原的抗体加上荧光标记,注入到细胞内,根据荧光便可以确定此蛋白在细胞中的位置
我知道我这样的回答是不对的,请问我这样大概能得几分?
免疫荧光 定位今天考研,考一道免疫荧光的问题,叫我说出一种实例我是这样回答的：比如想知道一种蛋白质在细胞内的定位,可以用
你所说的方法是采用荧光素分子直接标记抗体,在免疫荧光中被称为直接法.
更多的做法不是采用直接法而是采用间接法,也就是用对应某一种抗原的抗体（这里被称为一抗）与细胞孵育结合,在采用对应一抗（也就是抗一抗）的抗体（这里被称为二抗,二抗上偶联有荧光素分子）与细胞孵育结合后在荧光显微镜下观察.
间接法较直接法能够有效降低背景荧光,提高信噪比,同时由于抗体的放大效应使得检测灵敏度大大提升.
我就在做这方面的研究工作,如果需要的话可以共同探讨.
举例：对细胞微管蛋白进行亚细胞定位,用低聚甲醛固定细胞,NP-40穿孔,选择抗微管蛋白的抗体作为一抗,孵育后洗脱去背景,加入偶联荧光素的二抗孵育后洗脱去背景,上荧光显微镜观察.
希望能够对你有所帮助.
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