rna琼脂糖凝胶电泳电压及时间
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/18 01:11:42
你给的信息的确很少了.楼上2位都分析的很好,不过,我补充说一下露姬雅关于质粒三条带的解释.现在对于3条带的解释是这样的:最前面跑最快的是超螺旋,质粒是超螺旋的,你电泳的时候最亮很正常;中间的是开环质粒
电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而
不一定要取要取5µl,10µl,15µlDNA,你提取的应该是基因组DNA,主要看条带的位置判断你提取的DNA是否完整,从图上看出,与Marker比较,你提取的基因组DN
RNA跟DNA不一样,主要现象就是降解1.提取过程中RNA出现降解2.洗脱的时候洗掉了3.18S有部分降解4.弥散带说明降解严重,杂质过多5.28S部分降解RNA完美提出来的话应该是三条带:28,18
RNA分子有很多二级结构,需经变性剂处理,而DNA一般不需要变性处理RNA电泳的电泳槽及缓冲液均需要确保无RNAase,有RNAase抑制剂处理过;而DNA相应的则需要DNAase抑制剂处理所用的缓冲
电泳发热很正常,不过千万别把胶给热化了.如果你不放心,可以把电压调小一些,没必要一定用规定的电压跑电泳.电压小一点,无非跑得时间长一些,不影响结果.再问:请问怎么设置是恒压啊!!!再答: 不同的电泳
首先,点样孔很亮,说明样品有蛋白污染,其次,条带出现笑脸,有拖尾,是电压过高所致,建议减小电压,一般用90V电压跑,您可以试一下,如果还是出现拖尾可以将电泳槽放在冰上跑.至于胶浓度,您可以搜索一下,根
根据你扩增的产物情况选择合适分辨率的凝胶浓度,比如:如果你的条带离引物二聚体很远,且比较单一,那可用1%~1.5%的胶即可,可稍微制厚一点,方便点样;如果你的条带只有一两百即离引物二聚体很紧或者非目标
几个月没问题电泳槽里就不行了,没几天水分会挥发的,而且使用次数多了缓冲能力也会下降,隔几天就换或者往里再添加点新鲜的吧
核酸分子是两性解离分子,在高于其等电点的电泳缓冲液中,其碱基不解离,而磷酸基团全部解离,核酸分子因而带负电荷,电泳时向正极迁移.琼脂糖主要从海洋植物琼脂中提取而来并经糖基化修饰,为一种聚合链线性分子,
你这第一块是DNA第二块是质粒?怎么都有两条带?而且看你PCR结果基本没有扩出来啊,也不知道你要问什么问题.再问:第一个是质粒,第二个是DNA,pcr确实没扩出来,就分析一下这几个图结果的原因(跑胶的
琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的,类似于标尺的作用.marker会跑出很多条带,对应带的片段长度是一定的(不同的marker,不同,可以查询);通过找到与样品平齐的带,可以间接地判定样品的片段
不用那么高你又不跑PAGE琼脂糖一般都不用超过220V一般如果是只调电压的那种150V左右足够用了如果是电流和电压同时调的50ma,100~120V就可以
蛋白污染可以考虑用酚氯仿多抽提几次,记得吸上清的时候小心点,宁可浪费也别吸到界面.一般后续还需要用氯仿/异戊醇抽提来去除酚.这样基本蛋白污染就可以去干净.实在不行,抽提一次后,就用蛋白酶K消化30mi
YoucanrunaDNAagarosegelat120V,butthecurrentmaybeshouldbehigherthan2mAwitharegularsizegel.Itwillbedif
120V,越高跑的越快,但是跑出来的效果会差一些.我一般都是120V跑的,跑多久看你要分出来的带多大,条带之间大小差多少.再问:多少V/cm?再答:这个我一般没有注意。。。。。。再问:好吧,谢啦
提取的时候饱和酚,氯仿需要定量,这些可以去蛋白.去除RNA污染,RNA酶活性,定量.凝胶电泳,试剂最好是即用型的,因为有些东西放久了会长菌.然后是染料的热稳定性和灵敏度.
首先要知道电压高低对跑胶的影响,才能决定快慢嘛电压高低是相对的,胶才是本质,电压过高会因为发热导致胶融化,跑太长时间marker会跑出去,甚至污染电解液如果电压相同,你配0.8%的胶肯定比配1.2%要
可能性太多了.1.你跑胶一般都要放MARKER或者叫DNALADDER吧,这个MARKER除外对DNA标记大小以外,还可以用来监控ELECTROPHORESIS的质量,如果MARKER显示而DNA没显
greenview没用过,只用过EB.我不在甲醛胶里加EB,好像那样背景比较高.我都是在变性RNA时在RNA loading buffer里加EB,胶上没什么背景.你先试一下看看吧