Actin基因条带亮而目的基因条带不亮时因为什么

我也遇到过这种问题,个人觉得可能是目的基因的定量引物不好,还有就是要优化PCR条件!

如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件：1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列；2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有

既然其他样本有结果,说明引物没有问题.而该样本GAPDH也有,说明cDNA没有问题.PCR试剂也OK.目的基因在这个样本中表达很低.如果是做定量的话建议用realtime.这样肉眼看不到的也可以由荧光

当然不一定,比如说你的目的基因的copynumber高或者PCR的效率高都会使得beta-actin的条带不如目的基因的条带亮

上下引物的Tm最好相似,不能差异太大,不然不好设计退火温度；内参条带很亮,说明RT应该没多大问题,问题可能出现在PCR上.没有目的基因是因为1该基因确实不表达；2你的引物不特意,到NCBI的Prime

在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧

1,首先需要根据三个目标基因及Actin的序列设计四对引物,引物设计原则同普通PCR引物,网上有很多介绍的,最好其中一个引物是结构基因部分序列+内含子部分序列这种模式.序列长一些25++,退火温度高一

目的基因和标记（抗药）基因处于同一个质粒上.一般所用的质粒这两个基因由不同的启动子驱动.抗药基因都是持续表达,所以只有含有质粒的细菌才能存活并被扩增.而目的基因则根据情况而定.如果只是用来扩增,而不需

目的基因是想要表达的基因,标记基因是有一定特点的基因,例如荧光基因,表达后可表现为抗某种药的基因等.原本受体细胞是不具抗药性的,若导入目的基因后受体细胞表现出抗药性了,则说明目的基因已经成功导入了.

提交不了答案.不要调一致把内参也检测了

为啥要把内参调一致呢你每次都也检测一下内参不就好了然后用目的基因的比上内参一般很少有什么调一致的吧.

这只能说是一种概率问题而已一般来说目的基因和标记基因都是被“捆绑”起来的但是他们互相脱落的概率是1%那么一般来说只要标记基因表达出来了那么目的基因就也是已经进入质粒里面了还有就是你下面那个问题一般这个

额,楼上……管家基因确实大部分是所有细胞中都要均一表达的,但重要的在于她的稳定表达,在细胞中的表达数量是较为稳定,浮动较小的.管家基因是相对于奢侈基因所说,它不会由于细胞分化而导致差异表达,在细胞中有

标记基因和目的基因并不在一起.本图采用双酶切,质粒的切口不会自连,所以无法复制,在含四环素的培养基上不能生长.只有转化了重组成功的质粒的大肠杆菌才会生长

这样子调内参基因的条带似乎是不严谨的．理论上来说,如果你用相同总量的cDNA或DNA模板,并用相同的内参基因引物对,相同实验条件和循环次数,你应该得到相同的内参基因条带,这才能证明你的每次实验操作是可

发个照片看看.

重新设计引物,把酶切位点给换掉.这是最保险也是最简单的方法.还有一种就是半酶切方法,做一个test,减少酶量,缩短酶切时间,这样就会有几种情况出现,至少会出现你需要的片段,这就要你去找合适的酶量和酶切

这个技术叫GeneSynthesis.现在已经可以商业化合成了,只要提供一段序列（可以任意设计）,厂家就可以照样合成出来.不需要进行任何PCR.这里给个厂家的连接

【摘要】：鉴定了覆盖拟南芥、水稻和杨树3种模式植物全基因组的20个拟南芥、18个水稻、22个杨树ACTIN蛋白基因,对其染色体定位、基因结构、基因复制等进行了综合分析.并在系统进化分析基础上,将ACT

我不了解你的实际情况,我给你几条建议：1.可能是内参引物有问题2.你扩增内参基因的PCR条件设计可能有问题,如Tm3.你用的是一块胶吗?加核酸染料了吗?