为什么不管用哪个基因的引物PCR,空白对照总是能P出和目的片段大小一致的条带
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/23 19:25:35
如果实验目的只是基因型鉴定,对PCR产物无其他要求的话,二聚体并非不能忍受,可以尝试以下方法优化反应条件:1.确定DNA模板为阳性,即确定含有目标序列;2.对退火温度设置温度梯度,琼脂糖电泳检测是否有
在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧
你的realtimePCR扩增的是cDNA啊,因此用CDS序列啊.
你看,你分别获得了1-1200nt以及1000-1400nt这两段序列,那么中间有200bp长度的序列是重叠的,对吧?也就是说你已经从序列信息上获得了这个CD区所有的序列信息.如果你只是需要序列信息的
构建载体需要酶切的,所以需要加接头的!
这个和PCR扩增所用的酶有关,这个酶叫TAQ酶,他不能直接与母链DNA结合,这能和引物先结合,在进行复制.引物是一段特定的RNA,与母链互补的系列结合后,TAQ酶在与引物结合,开始复制
电蚊香片不能经常用同一个牌子,要经常换换牌子.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/194473617?report=genbank
一条引物应该与A链一端的序列一致;令一条引物应该与B链在令一端的序列一致.走向应该都是从5’到3‘向基因内部走.
您应该使用巢式PCR来做这个实验.无论您是先提RNA再做反转录,还是直接从DNA中获得基因,考虑到模板的复杂性,都应当使用巢式PCR.建议您先从目的基因的上下游设计一段引物,即外引物,再根据目的基因上
首先,上下游引物20多个bp,4种碱基,想在基因组上找到2个一样的排列的情况是几乎不可能的事.所以,你只要确定了上下游引物,那么得到的就一定是你要的基因.其次,能问这个问题,说明lz对pcr的原理貌似
一般对于已知序列的PCR当然不要从保守序列来设计引物,只要从开放可读框前后开始设计就行了.需要从保守序列设计引物的情况一般是两种,一是某个物种里面某个特定基因序列从未被分离过,但其进化关系相近的物种有
PCR的目的是为了扩增目的基因小一点的基因可以直接合成但是大一点的基因就得用PCR扩增了引物是和目的基因的一端互补的单链DNADNN左边一个序列右边一个序列而且DNA的复制只能按照一个方向复制就是由3
线接错了,你的开关是双控开关,灯的那个线接到图纸的下方右空上,原来连的线不要连,左下边的左面孔是三插的地线接线孔,上边从左到右,1.2是插座的火灵线,3.4是开关的双控的两个接线孔,正宗接法是,上面1
克隆基因的编码框时,必须从ATG开始或UTR处开始.当你想表达这个基因时,PCR产物必须包括完整的读码框;当你需要该基因融合GFP时,不仅需要从ATG开始,终止密码子必须突变掉,而且目的基因与GFP必
我有一个关于primer5的使用技巧的文档,你需要的话可以给你,里面介绍很详细,其实引物设计都是很简单的,自己多试试就很简单了
那是显然的,所以在提rna做pcr的时候,如果里面混了基因组dna,那就有可能导致假阳性再问:谢谢,但是这不是我想要的答案。请问做半定量RT-PCR的引物怎么设计?可以设计在基因的非翻译区,然后扩非翻
首先,我们来说一下PCR技术所用的酶.所用的酶是TaqDNA聚合酶,现在已知的所有的DNA聚合酶在使单个的脱氧核苷酸聚合的时候都有一个共性,它无法从头开始,只能在一段序列的末尾续接.在生物体内DNA自
这个问题很简单,扩增序列应该称为目的基因,目的基因一般都上万bp,从两头开始当然不合适.PCR扩增只能扩增出上下游引物之间的序列,因为只有引物之间的DNA双链是解链状态的.你的问题说明你对基础知识掌握
“同一对引物可以扩增出不同基因;不同引物也可以扩增出相同基因?”“在基因诊断时,比如镰状细胞贫血是点突变,患者和正常人在突变点两侧的基因是一样的” 这里混淆了基因和基因序列的概念.患者和正常人的基因