（2009•闵行区一模）pBR322质粒是基因工程中经常选用的工具，如图1中Ⅰ所示．

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/23 22:32:15

（1）目的基因如果插入质粒的某抗性基因中，将使该基因失活．为了检查运载体是否导入原本无Amp^r 和Tet^r的大肠杆菌，将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图1中Ⅱ的菌落．再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图1中Ⅲ的结果（空圈表示与Ⅱ对照无菌落的位置）．
①pBR322质粒在基因工程中的作用是______．
②如图2是pBR322质粒上被某种酶识别的一段特定序列．a处被切割后，产生的暴露出来的单链碱基序列是______．如果要从生物细胞中分离目的基因，首先需要进行______，然后再用上述酶切割．将目的基因与质粒连接起来的酶作用于图中的______处．
③根据用途，上述（1）的叙述中所用培养基属于______，与图Ⅲ空圈相对应的图Ⅱ中的菌落表现型是______，由此说明目的基因插入了______中．
（2）如图3是pBR322质粒的部分碱基序列，所编码蛋白质的氨基酸序列为“甲硫氨酸-精氨酸-谷氨酸-丙氨酸-天冬氨酸-缬氨酸…”（甲硫氨酸的密码子AUG也是起始密码子）．
则：①、②两单链作为转录模板链的是______ （填序号），该链转录产生的mRNA的顺序是______；如果图中箭头所指碱基对G/C缺失，该基因相应片段编码的氨基酸序列为______．

（1）①基因工程中通常用质粒作运载体．
②a处被切割后，上侧链暴露出来的单链碱基序列是-TGCA，下侧链暴露出来的单链碱基序列是ACGT-；要从细胞中分离目的基因，首先要进行基因定位，然后用限制酶将目的基因切割下来，通过DNA连接酶将目的基因与质粒的黏性末端连接起来，形成磷酸二酯键，即连接a处．
③大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养进行筛选，所以培养基是选择培养基；空圈表示与Ⅱ对照无菌落的位置，Ⅱ培养基中加入含氨苄青霉素，Ⅲ培养基中加入四环素，所以空圈处表示能抗氨苄青霉素，但不能抗四环素，所以目的基因插入在抗四环素基因中，即Tet^r中．
（2）起始密码子AUG对应DNA模板链中的碱基是TAC，从图3中可知位于②链上．根据碱基互补配对的原则，从TAC开始配对，所以mRNA上的顺序是AUGCGGGAGGCGGAUGUC…；如箭头所指碱基对G/C缺失，使天冬氨酸发生改变，变成甲硫氨酸．
答案：
（1）①作为运载体
②-TGCA或ACGT-基因定位    a
③选择培养基       能抗氨苄青霉素，但不能抗四环素        Tet^r
（2）②CGGGAGGCGGAUGUC…甲硫氨酸-精氨酸-谷氨酸-丙氨酸-甲硫氨酸…

（2009•闵行区一模）pBR322质粒是基因工程中经常选用的工具，如图1中Ⅰ所示．基因工程中通常所使用的质粒是（2013•闵行区一模）基因工程操作步骤中，需要从受体细胞群中筛选出已获得目的基因的细胞，图1中①-③示一种筛选方法的过 16．在基因工程中通常所使用的质粒是（2010•闵行区二模）在“验证凸透镜成像规律”的实验中，应选用图甲______ 所示的透镜（选填基因工程中剪切基因的工具是基因工程中常用的是质粒有抗性标记基因? 质粒是基因工程中最常用的运载体质粒是基因工程中最常用的运载体，下列与质粒有关的叙述正确的是（　　）关于基因工程中质粒的表达作用质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是（　　） 1．质粒是基因工程中最常用的运载体,它存在于许多细菌体内.质粒上有标记基因如图所示,通过标记基因可以