如何根据电泳图确定载体和目的片段的加入量

目的基因（1.5 kb）与载体（4 kb）通过EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切位点连接重组,预测重组子的目的基因PCR电泳图 载体和目的片段连接目的片断与载体的摩尔比大于3-10：1.摩尔数怎么确定?除了用分光光度计测OD,同门说跑胶能估算,请问 如何能够在双元载体里面插入目的片段 目的基因（1.5 kb）与载体（4 kb）通过EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切位点连接重组,请预测重组子的目的基因PCR电泳 目的基因片段与载体质粒的选择? 目的基因片段与载体DNA连接的主要有? PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切?酶切下来的是目的片段和载体?然后再把它们连起来?很困惑. 蛋白质SDS-PAGE电泳分离胶和浓缩胶的浓度如何确定?上样缓冲液的倍数如何确定? 目的片段转入表达载体后我用什么方法可以检测我的目的质粒? 处理DNA（包括载体酶切和目的片段获得的片段）后的平滑末端还需要去磷酸化吗? 基因工程中如何避免载体的自我环化和目的基因的双向插入? 将切割后的载体和目的基因放在一起 并加入连接酶,会出现三种环状DNA?