聚合酶链反应原理

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/10 22:24:54

聚合酶链反应原理

PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物.PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板.每完成一个循环需 4分钟,3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍.到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝.
PCR的反应动力学 PCR的三个反应步骤反复进行,使DNA扩增量呈指数上升.反应最终的DNA 扩增量可用Y＝(1＋X)n计算.Y代表DNA片段扩增后的拷贝数,X表示平(Y)均每次的扩增效率,n代表循环次数.平均扩增效率的理论值为100%,但在实际反应中平均效率达不到理论值.反应初期,靶序列DNA片段的增加呈指数形式,随着PCR产物的逐渐积累,被扩增的DNA片段不再呈指数增加,而进入线性增长期或静止期,即出现“停滞效应”,这种效应称平台期数、PCR扩增效率及DNA聚合酶PCR的种类和活性及非特异性产物的竟争等因素.大多数情况下,平台期的到来是不可避免的.

聚合酶链（PCR）反应原理什么是聚合酶链反应(PCR)? DNA聚合酶和RNA聚合酶催化反应区别求PCR（多聚合酶链反应技术）发展史!有文献的砸上来帮下忙.. 聚合酶链反应-序列特异性引物法(pcr-ssp)需要什么样的环境下进行丙烯聚合反应课程设计聚乙烯聚合反应方程式和丙烯聚合反应方程式. 苯乙烯的聚合反应方程式. 丙烯醇的聚合反应方程式在聚乙烯中单体是什么?链节是什么?聚合度是什么?请写出丙烯加成聚合反应的产物. 苯乙烯和丁二烯聚合反应生成ABS的聚合反应式简述聚合酶链式反应（PCR）的原理和具体过程.