有谁知道怎么设计PCR程序,如何选用酶,不同酶的延伸温度是多少?

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：综合作业时间：2024/09/28 21:30:05

94 2min
94 20sec, 50-60 20sec, 68/72(pfu 68, taq 72) Xmin(pfu 500bp/min, taq 1kb/min), 25-40cyc (用于装载体,作转基因的,25cyc以减少突变可能性；用于检测,genotyping的,可以用35-40cyc)
68/72 8-10min
用于装载体的,要用高保真的酶,如pfu, 一般检测用taq就可以了.
再问：一般都是这样吗如果不出条带要如何改变条件？
再答：是的，这是通用程序，出不出带取决你的引物的Tm值，即50-60 20sec这一步。通常设置为你引物Tm值+3-5度为你的annealing温度。。如果有用，请采用。
再问：好的谢谢我试一下
再答：客气了，预祝成功。。

PCR变性温度是多少?退火、延伸、复性分别是多少? 设计pcr体系质粒扩增扩增片段1.8kb两引物都是87碱基pfu酶怎样设计预变性变性退火延伸的时间和温度我的引物g PCR引物设计原则在许多地方看过这么一句话：引物长度不能过长,否则导致延伸温度大于74℃,即Taq酶的最适反应温度,因而 PCR反应中使用TaqDNA聚合酶,延伸过程一般要需要的温度是（）℃ 如何用PCR技术检测酵母菌?如何选择引物?变性、退火、延伸的温度设置为多少比较合适,Buffer? 普通PCR和基因克隆PCR的引物设计有什么不同和注意事项? 试举两个进行PCR引物设计的生物信息学程序,并选用其中的任何一个对GenBank登录号为MMU41636 的序列设计一对 RT-PCR的引物如何设计? 荧光定量PCR的引物如何设计.. 退火温度递减的PCR程序叫什么询问PCR退火温度设计设计一个典型的PCR扩增程序和PCR反应体系.