SDS-PAGE测定蛋白质的基本原理是什么?简述它的主要步骤?

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/19 01:17:47

你必须先了解PAGE,它能有效地把不同类型的蛋白质分开的主要依据,是样品中各种物质的电荷和分子量的差异性.很长的原理.这里就当你了解了.
SDS即十二烷基硫酸钠,是阴离子表面活性剂,它能以一定的比例和蛋白质结合,形成一种SDS一蛋白质复合物.
SDS—PAGE分离蛋白的主要原理,是各种物质分子量的差异性.因为当SDS与蛋白质结合后,蛋白质分子即带有大量的负电荷,并远远超过了其原来的电荷,从而使天然蛋白质分子问的电荷差别就降低乃至消除了.与此同时蛋白质在SDS作用下结构变得松散,形状趋向一致,所以各种SDS一蛋白质复合物在电泳时产生的泳动率差异,就反映了分子量的差异.有公式lgMr=lgK-bm=K1-bm
步骤：蛋白质样品加入还原剂（2mer or 二硫苏糖醇）和SDS,变性（如煮沸）,点样,同时另一泳道加入分子量标准. 高压电泳.染色（如考马斯亮蓝法）.脱色,观察.

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