神马作文网PCR引物存放时间是多少
来源：学生作业帮 编辑：神马作文网作业帮 分类：生物作业 时间：2024/11/18 21:08:45
PCR引物存放时间是多少
最近做PCR实验好几次都扩不出来(郁闷死,以前从没这问题),反应体系和条件都是以前一见摸索好了的,唯一可能的问题就是试剂出问题了.PCR引物存放时间,这要看是什么状态,要是粉末的话,在-20度可以存放好几年;要是已经把引物稀释成液体状态的话,存放时间就要短一点了,但也可以存放一年左右的时间,甚至更长.不过这也要看你们实验室的冰箱是不是经常开启,要是是的话,存放时间就很受影响,实验室的冰箱就是经常打开,而且有时候大家找东西要找好长时间,所以引物总是用半个多月的时间,效力就下降了,PCR后的条带明显就没有以前亮了.建议你合成引物的时候,让公司每个OD分装成一管,每次你用的时候,取一管稀释成使用浓度;或者先稀释到储存浓度,分装后要用的时候再稀释到使用浓度.另外一定要注意避免反复冻融,反复冻融会使存放时间变短的.最简单的就是分装了,以储存浓度保存,稀释10或20微升,就可以用好些次,即可避免反复冻融还可以避免整管引物都被污染.干粉-20度可以保存一年,稀释后-20度可以保存半年.可以先稀释成100uM,分装成几管.然后再稀释成50uM和20uM的.每次用20uM的做PCR即可.尽量避免反复冻融.稀释用的水PH值要求大于7(TE比灭菌去离子水好),并且无菌.真空干燥的DNA呈干膜状或粉末状在离心管底部,开启瓶盖时小心不要丢失.