“dUTP可取代dTTP在需要多步扩增的PCR或RT-PCR中使用,好处是可以防止上一步dTTP被带入下一步扩增”
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:化学作业 时间:2024/11/07 03:38:12
“dUTP可取代dTTP在需要多步扩增的PCR或RT-PCR中使用,好处是可以防止上一步dTTP被带入下一步扩增”
这要用到一种UTP酶.上一批次实验用dUTP,PCR完后.做下一批实验时,可以先用UTP酶处理一下,如果留有微量的产物,这个酶可以把产物片段酶解成微小片段,而在94度变性时,这种酶会失活.不会影响本次实验.
再问: 谢谢 其实我是想问,为什么dUTP可取代dTTP,好处是可以防止上一步dTTP被带入下一步扩增?这是什么意思乜?这个dTTP是哪里来的?原来DNA上降解的?不好意思,在下菜鸟一只,只是被这个问题困扰已久,见笑…… 拜谢~~
再答: 普通的做PCR要用到dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP)。而这个新方法用是不用dTTP而换成dUTP. 这些都是PCR实验中要加入的东东啊。
再问: 为什么要用dUTP取代dTTP呢?有什么特别的说法么?谢谢
再答: 我说老兄啊。无语了,用dUTP取代dTTP,可以防止上一步的污染啊 (这要用到一种UTP酶。上一批次实验用dUTP,PCR完后。做下一批实验时,可以先用UTP酶处理一下,如果留有微量的产物,这个酶可以把产物片段酶解成微小片段,而在94度变性时,这种酶会失活。不会影响本次实验。 )
再问: 谢谢 其实我是想问,为什么dUTP可取代dTTP,好处是可以防止上一步dTTP被带入下一步扩增?这是什么意思乜?这个dTTP是哪里来的?原来DNA上降解的?不好意思,在下菜鸟一只,只是被这个问题困扰已久,见笑…… 拜谢~~
再答: 普通的做PCR要用到dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP)。而这个新方法用是不用dTTP而换成dUTP. 这些都是PCR实验中要加入的东东啊。
再问: 为什么要用dUTP取代dTTP呢?有什么特别的说法么?谢谢
再答: 我说老兄啊。无语了,用dUTP取代dTTP,可以防止上一步的污染啊 (这要用到一种UTP酶。上一批次实验用dUTP,PCR完后。做下一批实验时,可以先用UTP酶处理一下,如果留有微量的产物,这个酶可以把产物片段酶解成微小片段,而在94度变性时,这种酶会失活。不会影响本次实验。 )
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