已知我的蛋白质分子量很小,差不多在5KD以下,该怎样跑电泳啊?

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：综合作业时间：2024/11/18 10:06:04

不用配非常高浓度的胶.你可以做Tricine-PAGE,对于分离小肽非常有效.
再问：如果不用Tricine-SDS-PAGE这种方法，还有其他方法吗？
再答： Tricine-PAGE是最适合的方法，你下游打算做什么实验？
再问：主要是Tricine-PAGE比较麻烦，我从Thermo的网站上找到个关于小分子电泳的配方，比较简单，也做过几次，但是总是要出现溴酚蓝已经跑出去了，而样品才跑了一半。配方如下，分离胶：1.2ml乙二醇，3M tris-hcl PH8.45 1ml，40%丙烯酰胺1.8ml,40%AP4ul,Temed6ul.浓缩胶：3M tris-hcl PH8.45 0.5ml，40%丙烯酰胺250ul，RO水1.25，40%AP3ul，Temed8ul。还请帮忙分析一下。。。。
再答：我想溴酚蓝跑出胶而你的样品还在胶里边儿影响不大，你无非是要目的带留下。你的意思是没有办法达到应有的分辨率吗？
再问：因为样品中多数是20KD以下的蛋白，根本没怎么跑开，时间久了会跑弥散，还有我用的是200V恒压。
再答：那你这个比较麻烦，选择小分子量的蛋白marker作为电泳参照确定电泳时间。另外样品可以做前处理，比如超滤一下，尽量减少其它蛋白对目的蛋白的干扰，这样结果会好一些。
再问：点了marker的，5KD以下的也弥散了，也是只跑到了一半。
再答：既然这种方法适用性不好为什么不考虑换用最稳妥的Tricine-PAGE呢？
再问：因为我想搞懂这方法，看能不能进行优化。
再答：从事生命科学研究没有什么比时间更宝贵的了。有成熟而又简单的方法你还是应该用，不然事后你一定会后悔的。
再问：谢谢。。。
再答：不用客气。
再问：可以加您Q吗？以后可以多像您请教。
再答：略知皮毛而已，何谈请教。倒是你自始至终都采用匿名的方式……

蛋白质分子量单位问题相对分子量3108的蛋白质,是多少KD呢? 分离几种分子量30KD的蛋白质,应选用什么型号的葡聚糖凝胶求WB高手解惑：我的蛋白分子量91KD,该用多少浓度的胶,上样量多少啊? 蛋白质分子量想知道质粒中的耐红霉素基因编码的蛋白多少KD,还有胸腺嘧啶合成酶thyA多少KD 100KD 的蛋白质在大肠杆菌中好表达吗? 有关分子量：无机物如NaCl 和蛋白质的相对分子质量单位KD 之间是不是同样的概念?如何换算? 我的药物浓度是：6mg/ml 分子量为150kd .换算成mmol/L,怎么换算啊?换算公式是什么? 我想用琼脂糖凝胶电泳来测酶的分子量差不多300KD,想请问一下,该凝胶的浓度要怎么确定. 分子量是什么?比如蛋白质的分子量求蛋白质分子量：已知20种氨基酸的平均分子量是128,现有一蛋白质分子有两条多肽链组成,肽键共98个,此蛋白质的分子量接 RNA、DNA和蛋白质跑电泳所用的染料一样吗?如果不一样的话,各是什么? 有关蛋白质假设某一蛋白质分子的分子量为11054,20种氨基酸的平均分子量为128,在形成该蛋白质分子时脱去水的分子量