神马作文网如何设计带flag标签的引物
来源：学生作业帮 编辑：神马作文网作业帮 分类：综合作业 时间：2024/11/13 12:05:14
如何设计带flag标签的引物
1、aa sequence of FLAG tag:dykddddk （你可以查商品化质粒带的FLag tag确认一下）.
2、 核酸序列参考：gattacaaggacgatgacgataag（我通过Vector NTI backtanslate得到序列,然后做了些修改,具体分别用gat/gac错开连续的ASP氨基酸,避免在PCR时发生错配）,在酵母中表达没问题,能被FLag抗体 M2识别.
3、引物设计参考：5’ flag核酸序列－－目的基因序列--3',如果引物太长,可以考虑做两轮PCR（我做的是2轮PCR,所以有2中提到的避免错配设计）.
4、可以按照你设计的顺序克隆,不需要去掉ATG,翻译从第一个ATG开始,后面的ATG翻译为Met.
2、 核酸序列参考：gattacaaggacgatgacgataag（我通过Vector NTI backtanslate得到序列,然后做了些修改,具体分别用gat/gac错开连续的ASP氨基酸,避免在PCR时发生错配）,在酵母中表达没问题,能被FLag抗体 M2识别.
3、引物设计参考：5’ flag核酸序列－－目的基因序列--3',如果引物太长,可以考虑做两轮PCR（我做的是2轮PCR,所以有2中提到的避免错配设计）.
4、可以按照你设计的顺序克隆,不需要去掉ATG,翻译从第一个ATG开始,后面的ATG翻译为Met.