核酸的主要功能是什么?越全面越好!

核酸的主要功能是什么?越全面越好!

(一)核酸的紫外光吸收
在核酸分子中,由于嘌呤碱与嘧啶碱中含有共轭双键体系,因而有特殊的紫外吸收光谱,一般在260nm外有最大吸收峰,其吸收强度常以光密度表示,简称o.d.值(optical density),可以此定量测定核酸或其纯度.
(二)核酸与溴乙锭的作用
溴锭(ethidium bromide,简写etbr)是一种小分子有机化合物.它与核酸作用,可插入dna双螺旋结构中的碱基对之间.带有溴乙锭的dna分子,在紫外光照射下,可发出橙黄色荧光.在rna分子中,也因其有局部双螺旋结构,所以也可有此反应.在进行核酸电泳时,往往以此反应判断dna或rna的电泳速度及其分离情况.
(三)核酸的变性(denaturation)
核酸分子具有一定的构象,若某些理化因素破坏了维持核酸构象的次级键,则其构象发生改变,从而导致核酸的理化性质及其生物功能的改变,这种变化称核酸的变性.如在加热情况下,dna双螺旋分开而变为单链.这并不涉及核苷酸之间共价键的断裂,仅仅使有规则的双螺旋结构变成单链的无规则的“线团结构”.
dna变性后,其理化性质变化很大,例如,它在260nm处的紫外吸收峰升高,这是因为在双螺旋结构中的碱基发色团(共轭双键)因分子变性而暴露于外部所致.这种现象称增色效应(hyperchromicity).在热变性中,以温度对紫外光吸收值(o.d.值)作图,可得一“s曲线”.从曲线可见,在一相当狭窄的温度范围内有一较大的跳跃,取其最高值的1/2的横坐标上的温度值,称解链温度或熔点,常以tm表示,简称tm值.
(四)核酸的复性(renatutarion)
变性的dna在未被降解之前,只要除去变性因素,已分开的两条单链又可按互补规律逐步重新结合,而恢复成双螺旋结构.这个过程称核酸的复性,也称退火(annealing).
复性并不是两条单链简单地缠绕的过程,首先从单链分子的无规则碰撞运动开始,这种碰撞是随机的,与dna的浓度、溶液的温度以及离子强度有关.可能发生多次碰撞,当富含g、c序列部分相互靠近时,则易形成氢键,产生一个或几个双螺旋核心,这一过程称成核作用(nucleation).然后,两条单链的其余部分如拉链迅速形成双螺旋结构,该过程称拉链作用(zippering).若dna分子尚未完全变性时,则复性较快；完全变性的dna,一般需要较长的时间才能复性.复性的dna分子不一定是原有的一对互补链,大部分复性dna分子都不是原配的.
可以借电镜直接观察复性过程中双链的变化,也可用浮力密度法进行测定,因单链dna的浮力密度比双链dna大0 015g/ml.应用较广的是紫外吸收光谱,在260nm处测其光密度的改变.dna部分复性或全部复性,其光密度值会降低,这种现象称减色效应(hypochrmicity).根据od260变化情况,可测定dna的复性过程