您好.我最近的PCR扩的产物成弥散状,但是能看见目的条带,这是怎么回事啊,我之前试条件时都没有弥散

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/11 18:56:57

您好.我最近的PCR扩的产物成弥散状,但是能看见目的条带,这是怎么回事啊,我之前试条件时都没有弥散
这样的产物酶切能切吗?

可能性超多的
如果是同一个模版,同一个引物,同一条件的PCR,考虑模版/引物/buffer是否污染,引物是否时间比较久有降解.
Mg浓度/退火温度是否有改变?考虑降低Mg或者提高退火温度减少非特异扩增.
电泳缓冲液不干净也可能会使条带变难看.
再问：是这样的，DNA不同（但别人扩的就没有拖带），酶，缓冲液都是新的。引物前天我扩的都很好（当时扩的很少，就几个样）。条件没变。
再答：如果你再随机挑少量几个样品扩增：还有问题的话，建议你微调PCR的Mg或退火温度条件；如果少量样品没有问题，可能是你在做大量样品的时候时间比较长，引起降解或酶活性降低，注意一直在冰上操作哦。可以直接割胶回收纯化之后酶切，如果你之后要连接载体作克隆的话，还是建议你再优化条件，单一条带最好。

我的PCR条带弥散,阴性对照也弥散,但是不加引物不弥散,当然也没有条带,请问都是什么原因啊? PCR结果没有条带,都是弥散的,这是为什么二次PCR的产物电泳图观察,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾, PCR的产物跑琼脂糖凝胶电泳时,所有样都不出现条带,而是弥散状的,从投拖到尾,而maker却是好的,说明不是电泳的问题, PCR跑出来的条带比较弥散,主要有哪些原因啊? 单克隆验证,菌液PCR有目的条带的位置,但是质粒PCR后,却没有批出我的目的条带这是为什么呀请问若因为非特异扩增导致PCR产物弥散,理论上弥散带里是否应该包含目的条带?谢谢TT-TT 在做载体构建的时候,PCR时有目的条带,但是摇菌酶切没有东西,请问是怎么回事啊? PCR结果呈弥散状是什么原因造成的 PCR产物电泳检测结果点样孔很亮,没有目的条带.是什么原因?marker的条带正常. 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后出现很多弥散的条带是PCR的原因还是电泳的原因呢? 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么?