潮霉素抗性基因(Hyg)抗卡那霉素吗?或者卡那霉素抗性基因(Npt)看潮霉素吗?
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/09/25 07:26:59
潮霉素抗性基因(Hyg)抗卡那霉素吗?或者卡那霉素抗性基因(Npt)看潮霉素吗?
潮霉素抗性基因(Hyg)不抗卡那霉素,
卡那霉素抗性基因(Npt)不抗潮霉素
不同载体具有不同的抗性基因.
再问: 那为什么带Hyg标记基因的载体农杆菌菌液在加有卡那霉素的的YEB培养基中摇菌也能摇起来啊?
再答: 说到农杆菌就必须提到双元表达载体 双元表达载体系统主要包括两个部分: 一部分为卸甲Ti质粒,这类Ti质粒由于缺失了T-DNA 区域,完全丧失了致瘤作用,主要是提供Vir基因编码表达Vir蛋白的功能,VIR基因编码的virD2蛋白相当于反式作用元件,能够识别农杆菌转运DNA(T-DNA)两端24bp序列,进而将T-DNA以单链的形式切割下来,同时,VIR基因编码的virE2能够与单链T-DNA结合,形成T-复合物,在核定位序列的作用下,经过宿主细胞T4SS转运体系进入宿主细胞质。之后便是宿主细胞的转运过程,激活处于反式位置上的T-DNA的转移。 另一部份是微型Ti质粒(Mini-Ti plasmid),它在T-DNA左右边界序列之间提供植株选择标记如NPTII基因以及Lac Z基因等。 双元载体系统的构建的原理是Ti质粒上的Vir基因可以反式激活T-DNA 的转移。 与共整合载体所不同的是,它不依赖两个质粒之间的同源序列,不需要共整合过程就能在农杆菌内独立复制。 常用的农杆菌中已经转化了“卸甲Ti质粒”,这个质粒也有抗性,一般是庆大霉素和利福平等,而卡那霉素和潮霉素很少用在这个载体上的。 你自己构建的载体应该属于“微型Ti质粒”,这个载体会有两个抗性,一个是农杆菌识别的启动子驱动的抗性基因,是在农杆菌筛选阳性菌时用的,一个是35S驱动的抗性基因,这个是筛选植物抗性时使用的 你看看Hyg前是不是35S驱动的,如果是,那Hyg是在植物中表达的,用于筛选植物的抗性基因。
卡那霉素抗性基因(Npt)不抗潮霉素
不同载体具有不同的抗性基因.
再问: 那为什么带Hyg标记基因的载体农杆菌菌液在加有卡那霉素的的YEB培养基中摇菌也能摇起来啊?
再答: 说到农杆菌就必须提到双元表达载体 双元表达载体系统主要包括两个部分: 一部分为卸甲Ti质粒,这类Ti质粒由于缺失了T-DNA 区域,完全丧失了致瘤作用,主要是提供Vir基因编码表达Vir蛋白的功能,VIR基因编码的virD2蛋白相当于反式作用元件,能够识别农杆菌转运DNA(T-DNA)两端24bp序列,进而将T-DNA以单链的形式切割下来,同时,VIR基因编码的virE2能够与单链T-DNA结合,形成T-复合物,在核定位序列的作用下,经过宿主细胞T4SS转运体系进入宿主细胞质。之后便是宿主细胞的转运过程,激活处于反式位置上的T-DNA的转移。 另一部份是微型Ti质粒(Mini-Ti plasmid),它在T-DNA左右边界序列之间提供植株选择标记如NPTII基因以及Lac Z基因等。 双元载体系统的构建的原理是Ti质粒上的Vir基因可以反式激活T-DNA 的转移。 与共整合载体所不同的是,它不依赖两个质粒之间的同源序列,不需要共整合过程就能在农杆菌内独立复制。 常用的农杆菌中已经转化了“卸甲Ti质粒”,这个质粒也有抗性,一般是庆大霉素和利福平等,而卡那霉素和潮霉素很少用在这个载体上的。 你自己构建的载体应该属于“微型Ti质粒”,这个载体会有两个抗性,一个是农杆菌识别的启动子驱动的抗性基因,是在农杆菌筛选阳性菌时用的,一个是35S驱动的抗性基因,这个是筛选植物抗性时使用的 你看看Hyg前是不是35S驱动的,如果是,那Hyg是在植物中表达的,用于筛选植物的抗性基因。
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