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双酶切线性DNA需要去磷酸化吗,一条线性DNA分子,双酶切,一个黏性末端,一个平末端,切好的DNA分子片段需要去磷酸化处

来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/09/25 01:22:06
双酶切线性DNA需要去磷酸化吗,一条线性DNA分子,双酶切,一个黏性末端,一个平末端,切好的DNA分子片段需要去磷酸化处理吗,如果不处理,会不会在连接的时候不同片段的平末端之间直接相连导致最后测序的时候缺失序列!
双酶切线性DNA需要去磷酸化吗,一条线性DNA分子,双酶切,一个黏性末端,一个平末端,切好的DNA分子片段需要去磷酸化处
平末端会存在这种情况.你连接的时候可以加点PEG,加大连接酶量,挑斑时多挑几个单克隆,先自己做个PCR验证或者双酶切验证,再送去测序.
再问: 我不连接质粒的,直接链接接头,然后用接头序列设计了引物,PCR产物直接测序···
再答: 这样啊,那去磷酸化处理下比较好