求助-用MRS培养基培养干酪乳杆菌怎么也不长,怎么回事啊?有哪些原因呢,哪位大侠指点一下,万分感谢!
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/23 19:44:40
求助-用MRS培养基培养干酪乳杆菌怎么也不长,怎么回事啊?有哪些原因呢,哪位大侠指点一下,万分感谢!
MRS买的商品化的,PH5.7±0.2,加去离子水后115℃高压灭菌15min,温度不烫后倒板,板子干了之后划线接种干酪乳杆菌,37℃培养,试过了N遍,一点要长的迹象也没有,无氧培养也试过了,就是不长,都要绝望了,哪位大侠指点一下,可能有哪些原因呢,如果不是菌种的问题看,谢谢啦!
MRS买的商品化的,PH5.7±0.2,加去离子水后115℃高压灭菌15min,温度不烫后倒板,板子干了之后划线接种干酪乳杆菌,37℃培养,试过了N遍,一点要长的迹象也没有,无氧培养也试过了,就是不长,都要绝望了,哪位大侠指点一下,可能有哪些原因呢,如果不是菌种的问题看,谢谢啦!
个人认为这和菌株很有关系.试分析如下:
1 这个菌株来源是哪里?是否可靠?
2 如果原始菌是保存在甘油冻存管中,保存温度是多少度?-20℃的话一般半年到一年后就很难再培养起来,-80℃的话比较保险.另外是否经过反复冻融?理论上冻融一次就不行了.
3 有没有试过先将菌株在液体培养基中培养?很多时候菌株状况不好的话,在液体培养基中更容易生长,只要液体培养基能长,再划线就基本能长了.
4 平板中培养基厚度是否足够?一般至少0.4mm以上的厚度较理想,太薄的培养基容易风干,风干了就肯定不长菌.
5 接种时所用的接种环在酒精灯火焰上消毒后是否充分冷却?
6 培养基是否反复灭菌?反复高温灭菌会影响营养物质.
7 培养基是否过期?
8 配制后的培养基pH是否肯定正常?是否用pH计和pH试纸都验证过了?
9 培养箱温度是否正常?是否用2支以上温度计试过?
10 有没有尝试过其他培养基?
个人认为,如果操作没有太大问题,菌种的好坏是决定性因素,你能否确定菌株没问题?如果是商业化购买的,可以和经销商联系.如果是实验室自己保留的,或者是其他实验室赠送的,能否追溯来源?
再问: 非常感谢你的回答,很详细很有帮助,我的菌株是购买的,接种液体培养基也没有长,但我镜检观察到了乳酸杆菌,请问这是怎么回事? 还有,我是否可以将酸奶涂到培养基里培养,以验证我的培养基是否有问题?谢谢!
再答: 如果镜检有杂菌,只能解释为污染,或者种子菌有污染,或者操作污染。 我们能买到的酸奶虽然可能是干净的,但不能排除有其他杂菌的污染, 不过很不好意思,我对这两种菌不是非常熟,刚才的回答也是基于微生物培养的通用知识及经验进行的尝试性分析。 建议你将这个问题反映给供应商,看看能否让他们重新发货;或者直接打电话给出售这个菌株的公司的技术支持,他们的经验非常丰富,肯定能帮你找到问题。 另外,推荐求助于生物谷或丁香园论坛,百度知道的“专业人士”毕竟少,很难获得有价值的帮助。网址: 生物谷主页:www.bioon.com 丁香园主页:www.dxy.cn
1 这个菌株来源是哪里?是否可靠?
2 如果原始菌是保存在甘油冻存管中,保存温度是多少度?-20℃的话一般半年到一年后就很难再培养起来,-80℃的话比较保险.另外是否经过反复冻融?理论上冻融一次就不行了.
3 有没有试过先将菌株在液体培养基中培养?很多时候菌株状况不好的话,在液体培养基中更容易生长,只要液体培养基能长,再划线就基本能长了.
4 平板中培养基厚度是否足够?一般至少0.4mm以上的厚度较理想,太薄的培养基容易风干,风干了就肯定不长菌.
5 接种时所用的接种环在酒精灯火焰上消毒后是否充分冷却?
6 培养基是否反复灭菌?反复高温灭菌会影响营养物质.
7 培养基是否过期?
8 配制后的培养基pH是否肯定正常?是否用pH计和pH试纸都验证过了?
9 培养箱温度是否正常?是否用2支以上温度计试过?
10 有没有尝试过其他培养基?
个人认为,如果操作没有太大问题,菌种的好坏是决定性因素,你能否确定菌株没问题?如果是商业化购买的,可以和经销商联系.如果是实验室自己保留的,或者是其他实验室赠送的,能否追溯来源?
再问: 非常感谢你的回答,很详细很有帮助,我的菌株是购买的,接种液体培养基也没有长,但我镜检观察到了乳酸杆菌,请问这是怎么回事? 还有,我是否可以将酸奶涂到培养基里培养,以验证我的培养基是否有问题?谢谢!
再答: 如果镜检有杂菌,只能解释为污染,或者种子菌有污染,或者操作污染。 我们能买到的酸奶虽然可能是干净的,但不能排除有其他杂菌的污染, 不过很不好意思,我对这两种菌不是非常熟,刚才的回答也是基于微生物培养的通用知识及经验进行的尝试性分析。 建议你将这个问题反映给供应商,看看能否让他们重新发货;或者直接打电话给出售这个菌株的公司的技术支持,他们的经验非常丰富,肯定能帮你找到问题。 另外,推荐求助于生物谷或丁香园论坛,百度知道的“专业人士”毕竟少,很难获得有价值的帮助。网址: 生物谷主页:www.bioon.com 丁香园主页:www.dxy.cn
请问培养植物乳杆菌和乳酸乳杆菌是不是都可以用MRS培养基?
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