大肠杆菌染色体实验中为什么提取不出DNA?那个步骤出问题了呢?
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/10/06 04:10:55
大肠杆菌染色体实验中为什么提取不出DNA?那个步骤出问题了呢?
(1)将2mL培养至对数期的大肠杆菌DH5α菌液5000rpm冷冻离心10min弃上清;
(2)加190μL TE悬浮沉淀,并加10μL 10%SDS,1μL 20mg/mL蛋白酶K,混匀,37℃保温1h;
(3)加30μL 5mol/L NaCl,混匀;
(4)加30μL CTAB/NaCl溶液,混匀,65℃保温20min;
(5)加入300μL酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)抽提,5000rpm离心10min,将上清液移至干净离心管;
(6)加入300μL氯仿/异戊醇(24:1)抽提,取上清液移至干净管中;
(7)加300μL异丙醇,颠倒混合,室温下静止10min,沉淀DNA;
(8)5000rpm离心10min,沉淀DNA,加入500μL70%乙醇,5000rpm离心10min,弃乙醇,吸干;
(9)溶解于20μLTE,取3μL 用于琼脂糖凝胶电泳验证,其余-20℃保存.
(2)加190μL TE悬浮沉淀,并加10μL 10%SDS,1μL 20mg/mL蛋白酶K,混匀,37℃保温1h;
(3)加30μL 5mol/L NaCl,混匀;
(4)加30μL CTAB/NaCl溶液,混匀,65℃保温20min;
(5)加入300μL酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)抽提,5000rpm离心10min,将上清液移至干净离心管;
(6)加入300μL氯仿/异戊醇(24:1)抽提,取上清液移至干净管中;
(7)加300μL异丙醇,颠倒混合,室温下静止10min,沉淀DNA;
(8)5000rpm离心10min,沉淀DNA,加入500μL70%乙醇,5000rpm离心10min,弃乙醇,吸干;
(9)溶解于20μLTE,取3μL 用于琼脂糖凝胶电泳验证,其余-20℃保存.
如何从大肠杆菌中提取染色体DNA
提取大肠杆菌DNA为什么不直接提取细胞核中进行提取的DNA而要从细胞质的质粒中提取?
DNA粗提取实验步骤?
大肠杆菌染色体DNA的制备实验
植物基因dna的提取实验中为什么没有将dna提取出来
细菌染色体DNA的提取各个步骤原理!跪谢~
CTAB提取植物中DNA步骤是什么?
“DNA的粗提取和鉴定”实验中为什么可以用菜花做实验材料?
噬菌体侵染实验中为什么必须用大肠杆菌培养出的噬菌体进行实验
染色体中DNA中某一片段缺失一个碱基引起的变异,为什么不属于染色体结构变异呢?求详细解释,谢谢!
在《DNA的粗提取与鉴定》实验的探究中,不应用什么作为原料?
在DNA的粗提取实验中,能不能用甲基绿染液代替二苯胺?