为什么我们进行16S rDNA测序时,要将扩增产物导入的细菌中,而不直接对纯化后的PCR产物直接测序?

来源：学生作业帮编辑：神马作文网作业帮分类：生物作业时间：2024/11/19 22:42:52

PCR产物直接测序是用PCR引物进行测序,
而测序两端引物结合位点会有几十个碱基读不出来.
这个是目前技术问题,所有公司的测序仪器都读不出来.
而TA克隆之后就是用载体的通用引物测序,
因为载体的序列是知道的,
所以即使两端有一部分读不清
也没有关系,
这样两个反应就可以测通拼接得到全长序列了.
再问：谢谢！那么，PCR产物直接测序用时PCR引物进行测序的原理是什么？
再答：因为TA克隆之后构建的重组质粒量少，不足以进行测序，所以要导入细菌扩增后再进行测序。
再问：谢谢！想再问一下PCR产物直接测序时，加入引物目的是不是让我们知道读不出来碱基的序列，然后测序技术把引物后的序列读出来，这样我们就知道完整的序列了？
再答：我不懂你说的什么意思。。。
再问：我的意思是，PCR产物直接测序时用PCR引物测序，测序两端引物结合位点的几十个碱基读不出来，但是我们知道引物的序列，这样即使引物那一段序列读不出来是不是也不会影响全序列测序？谢谢！
再答：是的，不影响。头尾几十个碱基出来的测序图谱很难看的，不过你已经知道了序列，也就不要紧了

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