挑取单克隆菌株,摇菌后检测为阳性,再将菌液接种到新鲜培养基(含必要抗生素)中为何摇不除菌?
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/11/13 08:02:21
挑取单克隆菌株,摇菌后检测为阳性,再将菌液接种到新鲜培养基(含必要抗生素)中为何摇不除菌?
再次摇菌时,菌液加了500ul
再次摇菌时,菌液加了500ul
摇菌后检测为阳性?请问阳性指标是什么?是什么抗生素?
再问: 我将构建好的载体质粒转入农杆菌,载体质粒的抗生素为kana,阳性检测是通过提取质粒酶切,得到我所需要的目的片段。加入的抗生素为Rif(50ng/ul)kana(25ng/ul)。
再答: 为什么加利福平呢?农杆菌抗利福平?
再问: 我们实验室的农杆菌是抗Rif
再答: 你的平板筛选时也用了两种抗生素吗?浓度呢?
再问: 是的,整个过程中用的抗生素的种类和浓度是一样的。
再答: 建议重新配置培养基、抗生素,所有试剂重新配置。这是实验室常见的现象,特别是如果使用国产培养基和试剂,如果与别人共用培养基和试剂,经常产生这种现象。人多、手杂、交叉污染(菌株和抗生素都有可能)、培养基标记错了、浓度计算错了等等。
再问: 我将构建好的载体质粒转入农杆菌,载体质粒的抗生素为kana,阳性检测是通过提取质粒酶切,得到我所需要的目的片段。加入的抗生素为Rif(50ng/ul)kana(25ng/ul)。
再答: 为什么加利福平呢?农杆菌抗利福平?
再问: 我们实验室的农杆菌是抗Rif
再答: 你的平板筛选时也用了两种抗生素吗?浓度呢?
再问: 是的,整个过程中用的抗生素的种类和浓度是一样的。
再答: 建议重新配置培养基、抗生素,所有试剂重新配置。这是实验室常见的现象,特别是如果使用国产培养基和试剂,如果与别人共用培养基和试剂,经常产生这种现象。人多、手杂、交叉污染(菌株和抗生素都有可能)、培养基标记错了、浓度计算错了等等。
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