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做克隆时,请问在引物前加的一段保护碱基和内切酶序列需要和cDNA互补吗?

来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:综合作业 时间:2024/11/18 11:54:53
做克隆时,请问在引物前加的一段保护碱基和内切酶序列需要和cDNA互补吗?
做克隆时,请问在引物前加的一段保护碱基和内切酶序列需要和cDNA互补吗?
不需要,引物的5‘端可以进行修饰,3’端需要严格保证与cDNA互补.举个例子
cDNA:ATGatcgatcgatcgTAA
引物:gg catatg TACtagcta
其中gg为保护碱基,catatg为NdeI酶切位点,都无须与模板配对,引物后面序列需要保证配对.