免疫组化BCA法是什么意思?
来源:学生作业帮 编辑:神马作文网作业帮 分类:生物作业 时间:2024/09/23 00:40:39
免疫组化BCA法是什么意思?
最好是能具体点,
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Bicinchoninic acid (BCA )法是近来广为应用的蛋白定量方法.其原理与Lowery法蛋白定量相似,即在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+.BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物,在562 nM处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比,据此可测定蛋白质浓度.与Lowery法相比,BCA蛋白测定方法灵敏度高,操作简单,试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳,并且受干扰物质影响小.与Bradford法相比,BCA法的显著优点是不受去垢剂的影响.
器材
1.7220型分光光度计
2.比色杯
3.恒温水浴箱
4.中试管7支
5.枪式移液管
试剂
1.试剂A:1%BCA二钠盐
2%无水碳酸钠
0.16%酒石酸钠
0.4%氢氧化钠
0.95%碳酸氢钠
混合调PH值至11.25.
2.试剂B:4%硫酸铜.
3.CA工作液:试剂A?100ml?试剂B?2ml混合.
4.蛋白质标准液:用结晶牛血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配制成1.5mg/ml的蛋白质标准液.(纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定)
5.待测样品:用双缩脲测定法的样品稀释而成.
具体可参照
器材
1.7220型分光光度计
2.比色杯
3.恒温水浴箱
4.中试管7支
5.枪式移液管
试剂
1.试剂A:1%BCA二钠盐
2%无水碳酸钠
0.16%酒石酸钠
0.4%氢氧化钠
0.95%碳酸氢钠
混合调PH值至11.25.
2.试剂B:4%硫酸铜.
3.CA工作液:试剂A?100ml?试剂B?2ml混合.
4.蛋白质标准液:用结晶牛血清白蛋白根据其纯度用生理盐水配制成1.5mg/ml的蛋白质标准液.(纯度可经凯氏定氮法测定蛋白质含量而确定)
5.待测样品:用双缩脲测定法的样品稀释而成.
具体可参照