重组质粒的大肠杆菌比野生的长得慢很多
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/02 08:44:50
首先要进行菌种活化,可以先从保存的菌种液中吸5ul,接种到加入了相应抗生素的5mlLB培养基中,200转每分钟,37摄氏度过夜.然后根据需要,如果要扩大培养,就按1:100的比例接种到大瓶的LB培养基
你需要的是理解:DNA是双链的吧.比如说左边一条是1的,右边的是2的.121212121212那么上下隔开1与1间就要用DNA聚合酶``连接单个链上的DNA片段左右1和2的就需要DNA连接酶```连接
一般程序如下:获得目的基因-准备表达载体-将目的基因插入表达载体中(测序验证)-转化表达宿主菌-诱导靶蛋白的表达-表达蛋白的分析-扩增、纯化、进一步检测.[主要试剂主要试剂]主要试剂1、LB培养基.2
我们也会遇到这样的问题,通常情况下,我们都是采用4℃保存,但是不超过24小时.这是我们的使用情况.
不一定.解析:作为目的基因运载体的一种,质粒被广泛适用于各种人为基因重组,其中大肠杆菌中的质粒以及农杆菌的Ti质粒最为广泛应用于转基因牛,抗虫棉,转基因羊等等家畜及农作物.再问:宿主细胞不会对导入的质
AC、人的胰岛素基因与大肠杆菌的质粒DNA分子重组不涉及减数分裂过程,基因自由组合定律和基因分离定律发生在减数分裂过程中,AC错误;B、DNA的复制具有半保留复制的原则,而人的胰岛素基因与大肠杆菌的质
注意一个问题,限制性核算内切酶识别的序列必然是一段回文序列,而不是随便的一个序列.回文序列的简单意思是在这段序列从3'到5‘读出的序列都是相同的.所以根据酶的专一性,只能用同种酶才可切出同种末端.
对呀如果将细胞涂在汗抗生素的板子上(或者培养基中),不含抗性基因的细胞就会被杀死,如果细胞成功的转染了质粒,得到了那个抗性基因,那么就不会被杀死,这个是最常用的筛选方法
好像和试剂盒没多大关系把,只能说菌没摇好,重新准备摇大瓶把,当然如果你认为是试剂盒的问题那么可以换好点的,比如axygen,或者其他更好的
1、这是作为保藏的手段,不然你怎么保存你的基因?2、这是获得自引物之间完整序列的必要途径,因为测序是无法获得待测序列起始部分和约800-1000bps之后的序列,因此需要连接到质粒上测序,俗称TA克隆
如果是重组质粒的话,应该两种,正义基因表达载体和反义基因表达载体.再问:���������廹���������������ͷ��������������
你的质粒提出来以后没有经过线性化,因此存在三种形态,超螺旋,单链开环和线性分子,其中只有线性分子可以用maker判断分子量大小,另外两种不行,如果你的质粒提的质量好的话,应该是超螺旋占优势,超螺旋会比
目的基因是利用重组质粒导入的,但大肠杆菌不一定会将它整合到自身基因中,目的基因有可能会丢失.所以质粒上需要含有标记基因,用标记基因来判断质粒有没有被整合,侧面反映目的基因有没有被整合.
重组质粒作为一个单独的质粒进入大肠杆菌发挥作用,不需要与ecoli体内原有的质粒结合……
基因表达载体的构建(即目的基因与运载体结合)是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心. 将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程.如果以质粒作为运载体, 首先要用一定
大肠杆菌的基因组包括两个部分:大肠杆菌染色体DNA基因组+质粒DNA基因组还不懂,就跟我聊天是菌体的一种命名方式,这个东西不用管它
大肠杆菌的天然质粒有ColE1、RSF2124、pSC101.第一个质粒有大肠杆菌素E1合成基因;第二个是第一个的派生质粒,带有一个编码氨苄青霉素抗性基因的转位子;第三个有四环素抗性基因(手机字母不好
氯化钙的确能提高转化效率质粒DNA和细胞壁表面的粘多糖都带负电荷,而二价的钙离子能促进两者的黏着,因此可以提高转化效率
什么基因?什么质粒?正常情况不用这样做的一般做表达用的基因片段是需要测序鉴定的连T载体就是为了去测序,证实你扩增片段没有突变且是你需要的目的片段然后再去连接你的目的载体就ok了
是F是吧~就是决定它们能不能发生接合~能结合就是能发生质粒基因的转移~