质粒转染
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/18 12:00:40
不知道你没杂出条带是因为什么原因,还有你杂交的抗体是目的蛋白的抗体吗?你杂杂标签蛋白试试,看看有没有条带啊?我这么说是因为,膜蛋白确实不好提取,而且提取后可能空间构想改变了,你的抗体可能识别不了了,而
只要没有整合到基因组DNA,转染进入的外源性DNA都会随着细胞分裂而被稀释.所以经过10天后表达肯定是会减弱的,这是正常现象.只有当外援DNA整合到基因组后,表达水平才能稳定
有的会,如高频重组菌株(Hfr)与F-菌株接合后,其F质粒中携带一部分该菌株的染色体DNA,这一部分DNA片段就有可能与F-菌株的DNA发生整合.
我觉得你是弄错东西了吧siRNA和miRNA是类似的都是用来沉默靶基因的表达不同的是miRNA是一个调控多个而siRNA是一个只调控一个你可能遇到的实验是先验证miRNA通过调控几个基因达到某种效果然
一般不应该是质粒的问题,如果你担心是反复冻融的问题,建议分装或是在4摄氏度解冻.最容易出问题的应该是转染试剂和细胞状态.不知道你用的什么转染试剂,PEI因为带正电荷,通常来说比较容易进细胞,但是毒性较
我有个室友前段时间也遇到了这种情况再答:后面找重庆威斯腾生物公司做的慢病毒,慢病毒感染后细胞死亡率低多了,效果还可以。
上清收了做ELISA细胞直接裂解提蛋白做WB
跟一般的片段插进质粒构建一样啊只是过表达的话扩增出来的片段必须包含该基因完整的CDS序列然后插入位点要在质粒的promoter后面序列不能有突变转染也和别的一样用Lipo啥的
应该还有优化的潜力的,我不知道你用的什么转染试剂.转染效率本身和你用的转染试剂有很大的关系,建议你先找来集中不同的转染试剂,用VenusC1或者是VenusN1作报告质粒,找到最适合你的细胞的试剂,然
看看lipo的说明书不就知道啦以6孔板的一个孔为例吧一管200ulOPTI+5ullipo静置5分钟另一管200ulOPTI+4mg质粒两管混匀静置20分钟后加到一个孔里4-6小时后换液再问:对于29
只需要摸一下质粒浓度和转染试剂的浓度
这个问题其实不难,但是你如果样本多的话,那还是建议找外包公司做吧,重庆威斯腾生物负责整体实验外包,做了10多年了,口碑很不错.
稳转吧?顺转不用切再问:酶切后纯化时能用普通胶回收试剂盒吗再答:单切回收其实不用跑胶有一种pcr产物回收或者dna片段回收试剂盒就行不知道胶回收试剂盒能不能不跑胶直接用
这个实验可以找威斯腾做,我以前也是在那里做的,效果很好.
任何东西都可以复制
就以慢病毒为例.包装好的病毒只含有结构质粒5'LTR和3'LTR之间的RNA序列.多质粒系统指的是慢病毒的包装系统,就三质粒(包装质粒、包膜蛋白质粒、转移质粒)包装系统来说,病毒包装必需的3个蛋白Ga
这个和你表达的蛋白有关系.如果转染后24h没有达到蛋白表达的峰值,或者呈比较低的表达量的话,做IF时可能会信号很低,有的甚至可能观察不到信号.但是有些蛋白表达时间比较早,24h就可以检测到了.如果时间
博凌科为您的情况我们去年也曾遇到过.目前市面上的质粒提取试剂盒林林总总,令人难以取舍.我觉得首先应该根据自己的需要来选取.进口的试剂盒,比如qiagene,omiga,promega等固然好,但是价格
我们都买的博凌科为的,价格公道,效果好性价比高!这各品牌的产品很不错的值得信赖的的!博凌科为的产品都挺好的,很多实验室都在用,这个品牌挺值得信赖的!