marker条带有多少种
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/11 18:30:06
模板是什么?基因组么?两次用的模板是一批做的么?时间长的话模板可能会降解
MARKER有好多种,你看看你用的是哪种,每种都会有个说明书告诉你你的MARKER的每条带指示是多大,然后看你的电泳图中亮条带对应的是MARKER的哪个位置
那就是PCR的问题了,建议用新的试剂再试下,最好先把反应液,酶,引物按比例先配好,再取混合液加引物
蓝色条带分别是溴酚蓝和二甲苯青FF(请注意不是二甲苯氰).溴酚蓝在琼脂糖中的泳动速率约与长300bp的双链线状DNA相同,而二甲苯青FF的泳动则与长4kb的双链线状DNA相同.希望能够对你有所帮助.
你的电泳缓冲液和制胶缓冲液浓度不准或者脏了吧?换新的电泳缓冲液和制胶缓冲液试试.marker都出问题说明是你的胶的问题,或者电泳操作的问题.
就只是你的目的基因菌液PCR扩增不出来么?不过我觉得你如果质粒、电泳、菌落PCR都能验证的话,菌液PCR结果如何都意义不大了.
如果用的Marker有颜色,对颜色.如果是一色的,往往是最小的那个很淡看不清.
如果marker跑在胶上的话说明胶是没问题的,要么是你样品蛋白含量太低,可以将样品浓缩一下,也可以加大上样量;或者可能你配的胶的浓度有问题,这样样品可能跑不开,建议根据蛋白的分子量按照分子克隆选用分离
不排除是预染Marker质量又问题再问:marker没有问题,实验室其他人做实验就没有问题。因为我是独立出来的,所以实验过程和仪器与他们不是很相同再答:那建议你在适当延长一下转膜的时间吧,三、四个小时
第一:你这个胶跑的时间太久了!第二:你这个模板加的太多了!第三:你这个酶加的太多!第四:你的模板可能纯度不高如果以上问题都解决了还是没有改变,你可以考虑重新设计合成引物了再问:谢谢您,我排除时间一下时
一个可能原因,DNA结合了蛋白质,所以跑不出去.加loadingbuffer后加热(90度以上)一下再上样试试.另外一个原因,你的产物特别大(不一定是目标产物)再问:我做的是菌落PCR电泳检测结果,我
你好!我也做western有一段时间了很高兴和你探讨下这个问题我觉得该现象很可能的原因是转膜过程中出问题了,即1、转膜后的mark非常歪的原因是胶、膜以及滤纸(三明治组合)之间气泡没赶干净导致的.2、
第一种意思是作记号的人,打分数的人,记分器,划线器,指示器第二种意思是标靶兵,标兵,标杆,旗标,书签第三种意思是(校中专职)点名先生,经常给学生记分数的先生,监猎人第四种意思是(轰炸用)照明弹第五种意
有很多影响因素:模板浓度,引物浓度,酶在反应过程中的不断消耗,循环数和温度等等.如果你已经P出来目的片段的话温度应该是适合的,可以加大模板和引物的量,建议回收片段后作为模板再P,这样得到的片段会较亮.
原因很多,你是否提到了DNA,可以将你跑的DNA直接跑胶看看,到底有没有条带;PCR扩增的程序有没有问题,或者引物是否有问题,可以找个对照DNA试试,相同扩增条件下,是否扩出条带,如果扩不出来就用可能
博凌科为-为你你用的凝胶染色剂是EB还是Goldview,如果是后者,那Marker一般都跑的不理想.
首先,检查你的agarosegel浓度.一般以0.8%为标准(0.8g琼脂糖+100mlTEbuffer).如果你的目标片段较小(小于100bp),请适当提高凝胶浓度(1.2%-1.5%).其次,如果
做一下考马斯亮蓝染胶看是不是全部转完了.照您的描述,应该是转上了,可能是有点过.也可以做一下丽春红染膜,确认看看是不是转上了.同意黑皮地雷的说法,Marker很容易转上的.
我觉得主要是胶和电泳缓冲液的问题,Tris8.86.8浓度,pH是否正确.SDS的纯度可能也有关系.丙烯酰胺的浓度,交联度合适不合适.做胶的时候各种溶液是否加的正确,胶的浓度是否合适,电泳缓冲液的浓度
PCR扩增的结果和模板的质量有直接的关系,在PCR扩增中如果模板纯度高,很低的量都可以进行扩增的.提取细菌的DNA量不多但纯度高,即使DNA电泳检测不到条带,PCR仍然能扩出条带.希望你看明白了.