确定切割某种目的基因的限制酶的种类
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/09/21 02:50:03
识别序列有区别--G↓GATCC--限制酶1,2都可以切,但是--↓GATC--只能有酶2切.懂了么,就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切,但是酶二只需要识别出4个这样的排序,酶二的选择性比较低
1.只有这样才能保证切得是同一位点2.一样
1,运载体和运载体连接2,运载体和目的基因连接3,目的基因和目的基因连接
楼主犯了一个概念性错误.限制酶并不能切割出基因来,而只是能够识别并且各特定的核苷酸序列.如果某个基因上具有能被某种限制酶识别的核苷酸序列,那么它就能被该限制酶切割.
基因是DNA片段,目的基因的获取当然是切开DNA
具有相同的粘性末端的两条DNA链在连接酶的作用下相连.只有一种酶切时,切出的粘性末端相同,让目的基因和质粒相连接即可,但是由于是混合,连接的结果不尽相同.DNA连接酶将目的基因和质粒粘性末端的3-5磷
识别序列有区别--G↓GATCC--限制酶1,2都可以切,但是--↓GATC--只能有酶2切.懂了么,就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切,但是酶二只需要识别出4个这样的排序,酶二的选择性比较低
就是说,必须在保证该质粒可以存活的情况下,才可以加载其他的基因,而质粒存活又需要一定的基因片段,所以这些片段不能被用来插入目的基因.
他也可以切割质粒啊,标记基因什么的
目的基因就是含有我要的那个DNA片段,当然还有其它无关片段,与质粒重组的后叫重组质粒.限制性内切酶不可能就刚好切出需要基因,少切了会破坏需要基因,多切了倒可以,只要有需要基因就能表达出相应产品.
好处有两点:1可以有效的避免载体质粒自连,提高重组质粒的比例.2可以控制插入片段的的方向.因为单酶切的话插入的方向是随机的,而双酶切片段的插入方向是一定的.
好吧之前弄错了一般情况下,要把目的基因连接,需要用同一种或同两种限制性内切酶酶切质粒和目的基因.在本题中,酶II的识别序列是酶I识别序列的一部分,如果质粒用酶II处理,那么在geneI和II区都会被切
限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-,可知限制酶II能够识别和切割限制酶I切割后的黏性末端.据题图可知,目的基因两端分别是限制酶I的识别序列和切点是
(1)图1质粒有SmaⅠ限制酶两个切割位点,用SmaⅠ限制酶切割该质粒会得到2种2个DNA片段,每个DNA片段有2个游离的磷酸基团,所以产生两个DNA片段会增加4个游离的磷酸基团.(2)从图2可知,目
不对,因为太绝对!一般情况下是用同一种限制性内切酶,这样暴露同样的黏性末端,然后用DNA连接酶进行连接.但是也存在不同的限制性内切酶切割形成相同的黏性末端.
因为人工合成的DNA是不需要切割的.合成人工的基因是依靠对目的蛋白质的功能预测,然后依照密码子规律,列出相应的RNA链,再反推出DNA的一条链的碱基排列顺序,然后依靠碱基互补配对原则推出DNA的另一条
应该选用有相同的切点的运载体再问:这是前提吗?再答:是条件,否则不可能成功
那个08还是07的高考题里面,就可以作为一个有多个切口的例子.说实话,那个题目是一个实实在在的披着生物学小外衣的数学题, 还非常的简单查看原帖
这样可以使切割后的目的基因与质粒连接上
一定要相同.只有用同一种限制酶剪切目的基因和切割质粒,才能暴露相同的黏性末端或平末端,便于DNA连接酶的拼接