DNA的提取为啥用到纱布,不用滤纸
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/19 00:09:10
鸟类血液中红细胞有细胞核,细胞核内DNA与蛋白质结合成染色质
(1).浓盐法(2).阴离子去污剂法:(3).苯酚抽提法:(4).水抽提法:(5)磁珠法,目前最快最间简洁的方法,用磁分离技术,详情请看惠尔公司提供的磁珠分离方法
(a)\x05磁珠法中的细胞裂解液是一种蛋白变性剂,可使动植物的细胞裂解,并使与DNA结合的蛋白质变性,DNA游离释放,磁球可以特异地吸附DNA,通过洗涤,去除DNA以外的RNA、蛋白质等杂质,再因洗
可以,有人用胰蛋白酶也做出了同样的效果,还有某些实验室不用蛋白酶K,而单纯依靠酚抽提去除蛋白质,酚能使蛋白质变性,而且能将变性的蛋白质溶解在其中.氯仿也是一种有效的蛋白质变性剂,且能促进两相的分离.D
a)磁珠法中的细胞裂解液是一种蛋白变性剂,可使动植物的细胞裂解,并使与DNA结合的蛋白质变性,DNA游离释放,磁球可以特异地吸附DNA,通过洗涤,去除DNA以外的RNA、蛋白质等杂质,再因洗脱液解离吸
实验中要用到含有DNA的鸡血细胞,全血包含血浆等不含有DNA的杂质~
制备鸡血细胞液沉淀后去上清——放入清水中吸水涨破——过滤去细胞碎片留虑液——加2MOL/LNaCl——使DNA析出——过滤去滤液——2mol/LNaCl再溶解——过滤去多余DNA——加体积分数95%冷
你说的是粗提取吧?注意事项:first实验材料不能用猪血代替鸡血,因为哺乳动物成熟红细胞木细胞核儿~~second制备鸡血细胞液时,注意向鸡血中加入柠檬酸钠,防止血液凝固3搅拌时沿一个方向搅拌4使细胞
中间似乎需要高速低温离心的,有些植物种类因为多糖等成分过多而导致离心无法去除,则需要添加一些可以降解多糖的(糖蛋白)的成分,我们做过的植物一般的草本的相对容易提取,木本的则混合物较多,难以提取的很纯.
质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用,它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单.而基因组DN
哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核,没有DNA.
核甘酸\酶
简单一点的,直接沸水煮一下;CTAB裂解法,酚氯仿抽提等,很多种
裂解细胞是为了获得其DNA,方法有很多种,超生裂解,碱裂解等等细胞裂解液的主要目的:1.利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;2.溶解蛋白;3.蛋白变性使其稳定;4.抑制蛋白酶活性一般细胞裂解液的成分
做叶片色素层析时,是用滤纸做的,所以不用滤纸的原因应该是滤纸会吸附叶绿素从而影响实验结果.
从血液中
请查找CTAB法,或者玻璃珠法,还可以咨询试剂公司,现在的商业化产品线很丰富了
很有可能有蛋白,或许其它的东东,你最好测260nm.280nm230nm处od,看看他们的比值,才好判断到底是什么被污染了.因为蛋白的吸收峰是280nm.纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0
蛋白质对DNA制品的污染常常影响到以后的DNA操作过程,因此需要把蛋白质除去.一般植物蛋白除了大豆外都是不完全蛋白!很明显菜花的蛋白量不会影响或影响很小所以二者提取有区别!再问:也就是说植物的蛋白质较
真菌的细胞成分和植物是有差别的,这种专一性的植物DNA提取试剂盒不一定能提好真菌的DNA.如果有条件你最好是买专一性的真菌DNA提取试剂盒.不过植物DNA提取的CTAB法确实可以适用于真菌的DNA提取