DH52感受态

1感受态细菌细胞经过处理,更容易吸收外界DNA.2非感受态细菌也能被转化,但效率非常低.

楼上别扯了,那是为了让细胞膜流动性降低,利于DNA的结合,同时使细胞暂停生长,维持在对数生长期的高活性!

若感受态细胞要保存备用,液氮保存最好,其次一70℃,添加20％甘油利于冷冻保存,但添加保护剂对转化率有抑制作用.

1、将培养液转入离心管中,冰上放置10分钟,然后于4℃下3000g离心10分钟.2、弃去上清,用预冷的0.05mol/L的CaCl2溶液10ml轻轻悬浮细胞,冰上放置15-30分钟后,4℃下3000g

应该是保持内的渗透压,保持细胞的正常形态,因为na和cl是细胞物质运输的重要离子

不可以,感受态细胞是属于处于一种特殊状态的细胞,膜结构处于比较容易接受外来质粒的进入,但是你说的感染人事不成立的.试验用的大肠杆菌感染人应该说的是细菌感染,但是实验室的大肠杆菌已经是弱化了的,不具有强

1、“切开的质粒”等于“线性DNA”.2、“线性DNA转化细菌、以及真菌的原生质体”已经成功.所以,切开的质粒能转化进入感受态细菌.但是,不能复制.如果质粒上带有与细菌染色体上同源序列,质粒可以重组交

首要问题就是操作是防止污染,因为这个是最容易影响感受态制作的因素.其次,就是悬浮沉淀的过程,一定要轻轻悬浮,最好轻摇悬浮,如果用移液器,把枪头前面剪掉一部分,然后再吹,这样吹的比较柔和.其他的,应该没

感受态大肠杆菌是指受Cacl2或电击处理,非常容易吸入附在大肠杆菌细胞表面的外源DNA的一种特定形态,常用于基因工程不是一种大肠杆菌,而是大肠杆菌在特定情况下的特定状态

冰浴过程中,原来加在溶液中的钙离子和细菌细胞膜结合,在低温下形成液晶结构,这样,在42度热激下,这种液晶结构收缩,将细胞膜扯开孔道,使DNA进入细菌细胞中.这就是原理.前面冰浴不清楚,热激我认为是让已

经过适当处理后容易接受外来DNA进入的细菌.如大肠杆菌经CaCl2处理,就成为容易受质粒DNA转化的细胞.

会长菌,但质粒中不会有你需要的目的基因片断,这就是所谓的假阳性结果.再问：但是质粒已经打开了。。成线状了，它会回复成环状吗？再答：质粒那段切口只有十几、几十个bp，而一个质粒都有上千个bp，他的结构是

完全可以,我们以前就是放液氮里的～

1.将冻存的菌种1：100接种于3ml的LB液体培养基中,37℃摇床过夜震荡培养.2.取1ml活化菌种接种于100mlLB培养基中,37℃摇床培养1.5-2h.3.将菌种在冰上放置10min.4℃、4

要看你做的是什么了.大肠杆菌感受态根据用处的不同,也有很多种类,比如比较常见的TOP10、DH5α,质粒保存较为稳定的JM109、STBL3,表达所用的BL21等等.除此之外,植物基因转化常用土壤农杆

冰浴是为了质粒附着在菌体表面,热击是打开通道让质粒进入,觉得LZ的做法影响不大,不过要实际验证

膜相关DNA结合蛋白：位于细胞表面,经细胞自溶素处理后能暴露出来,从而具有与DNA结合的活性.核酸酶：降解外源双链DNA中的被核酸内切酶切开的一条链,使最终进入细胞的外源DNA只有一条链.细胞自溶素：

感受态细胞你先用稳定浓度的高纯质粒测一下效率,如果达不到10的5次方就别用了.如果效率挺高有6或7次方而转化子不多,那么就和你构建的质粒有关了.制备感受态,一个要快,二要一直保持细胞在冷冻状态,所有e

所谓的转化是将外源DNA分子引入受体细胞,使之获得新的遗传性状的一种手段,它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究领域的基本实验技术.在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人

对照组被污染了,或者氨苄有问题,或者在配制培养基的时候在培养基还没冷却的时候就加了氨苄.其实大肠杆菌感受态可以买的,又不贵.自己做太麻烦了.我已经说了啊,可能是对照的大肠杆菌被污染了,或者这些大肠杆菌