文献上查的PCR扩增长度比较长,设计的只有200多bp

文献综述还可以查吗?文献综述是你把你看过的所有文章进行整理而得的,文章不同,角度不同得到的文献综述都不一样,你用来干什么的呀?

什么跟什么说的太不清楚饿了只要你需要的那段序列是对的不就行了嘛跟引物序列有啥关系毕竟大部分的PCR引物设计都是在需要的序列两端隔一段距离而且如果你测序是拿PCR引物测的话那前面的几十个碱基都是测不准的

第二次比如目的基因是300bps,母链DNA2000bpsforwardprimer从母链第25碱基开始由5'-3'开始复制,backwardprimer从第325由3'-5'开始反向复制.第一次复制

原理均是碱基互补配对、半保留复制体内合成需要酶系的参与,温度是体温,双链DNA是通过酶解,而PCR模板双链DNA是通过高温（90~97度）变性,结成单链,由于高温所以使用的聚合酶也不同,是耐高温的Ta

可以用,没有任何特别问题.实际上,如果你用过一些引物设计的软件,有时候你会发现,软件设计出来的引物长度有可能不同（当然,大部分时候是相同的）,这有可能是考虑的引物Tm,引物二聚体,引物非特异性结合等问

博凌科为多重PCR扩增试剂盒超高活性高特异的耐热DNA聚合酶该试剂盒是专门为多重PCR研发的专项产品,包含多重PCR实验所需的全套试剂.其中MultiHotStartDNAPolymerase是目前发

我个人感觉对PCR影响最大的是模板质量和退火温度,至于其他的影响因素那就太多了,模板纯度浓度,引物质量,体系中的物质（buffer,酶,Mg2+,dntp浓度）,退火和延伸温度.一般来讲,引物从ref

以PCR产物为模板,只要引物,体系对,怎么P怎么出.你的模板就是PCR产物,浓度再低也没事,稀释100倍没问题.没什么要注意的

解题思路：PCR技术解题过程：varSWOC={};SWOC.tip=false;try{SWOCX2.OpenFile("http://dayi.prcedu.com/include/readq.p

能说下原题么、

貌似没听说过,你的酶和dNTP买回来之后说明书上会给出你合适的体系,那个dNTP绝对都是足量的.

引物长度和专一性常见的引物长度为18-30个碱基.短的引物（≤15碱基）能非常高效地结合,但是它们的专一性不够.较长的引物能提高专一性,然而退火效率低,从而导致PCR产量低下.同时应避免编码单一序列和

我也遇到过类似的问题,根据同源性设的引物来PCR,结果出来的是非特异条带,要不就是没有.还是得优化条件比如引物和模板的比例

PCR产物测序的最大风险是有在凝胶上看起来的一个条带,实际上有多个分子.也就是说长度相似的分子有可能在电泳的时候只有一条带.如果只是进行PCR产物回收,没有进行凝胶分离的过程的话,东西可能更多了.问题

非特异性条带的出现,其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体.二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低,及PCR循环次数过多有关.其次是酶的质和量,往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一

PCR非特异性扩增指的是你进行PCR所扩增出来的条带不是所要的,引物与模板在非目的条带处有错配,导致延伸产物不是目的条带.非特异性扩增在琼脂糖电泳时可以看到在目的条带外出现了其他条带.引起非特异性扩增

PCR(聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95度时解旋,55度时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至72度左右DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链.由PCR技术制造

可分为长产物片段和短产物片段两部分.短产物片段的长度严格地限定在两个引物链5'端之间,是需要扩增的特定片段.短产物片段和长产物片段是由于引物所结合的模板不一样而形成的,以一个原始模板为例,在第一个反应

PCR扩增出目的片段,需要自己提取模板,可以是RNA,或者DNA.引物会结合模板,如果特异性不够好,比如引物与模板的其他位点结合,在PCR过程中就会产生很多不同条带.

1退火温度不合适2引物不合适3模板有问题4酶由问题