引物设计序列下载要下载什么样的序列

一般未知的序列旁边都有已知的一段吧,就是你说的“修饰片段”?PCR这种flankingsequence可以有很多方法,比如TAIL-PCR,用ADprimer（简并引物）和特异性引物就可以得到目标片段

从NCBI中下载基因的序列,再用DNASTAR进行比对,那是保守区域!

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你先设计几条引物,然后上NCBI数据库BLAST一下（在外显子上设计比较好些）再问：我的想法是先将已知的序列与同源物种比对，以同源物种多出的区域设计上下游引物，可是这样得到的引物分值太低，怎么办再答：

wormbase

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/194473617?report=genbank

FPrimer:5'-TTGTAAAAAAATTAAATTAA-3'RPrimer:5'-CATATTTTAATTAATATTTC-3'你这个序列AT含量太高,尤其是5'端A有7个连续重复,引物本身很

把这段基因输入设计软件里,调节引物位置,使变性温度在94度,退火温度=Tm-（5到10度）延伸温度72度左右,满足这些条件基本就可以了,当然还要根据实际情况多次实验得到最佳引物.如果你要扩增整个的基因

给你发了一份,你看看,满意望采纳~再问：对不起，那个没收不到，可以再发一遍吗？谢谢！再答：又给你发了一遍，显示的发送成功，两次都是，你再看看。不会在垃圾箱里吧——|||留的邮箱应该没错吧

如果你用来PCR的模板是DNA,那么设计引物的时候不需要考虑编码非编码.考虑外显子内含子是在你的模板是cDNA的情况下,也就是转录剪切过了,这个时候cDNA里没有内含子了,那么设计引物就要避开内含子.

这问题都上百度知道来问了,你也是生物专业的研究生吧.PrimerPremier5这个软件设计引物用很不错的.

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cDNA和mRNA的序列是互补的,如果用两个引物,最后的两条DNA序列分别对应于mRNA和cDNA中的一段.由于引物方向从5‘至3’,所以两个引物对应于mRNA和cDNA中相应序列即可.

试试primer软件.

1.有突变,这很常见,再做一次确认.如果确实是的,把结果投GenBank.2.PCR出错了.-重做PCR（比较少见）3.测序出错.建议先做克隆,再测序.这样就可以多挑几个克隆去测序,万一有几个出错,还

根据cDNA序列设计就行了,不用加3‘utr,你做载体构建还是tr-pcr基因检测?再问：做rt-pcr检测。我们老板说要加上3‘utr的序列，不知道为什么？再答：不用加，我做rt-pcr检测那么多了

在百度里搜爱问共享资料,在那里搜散文啊什么的应该就能找到你要的,实在不知道找什么就搜新概念2,文章都不难,要MP3就把MP3打上,我前不久下载的3,很好用.需要什么资料可以到这里看看,热门的东西都有,

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不用太纠结,有点儿具体也是可以的,一般都能P出来.再问：很多mRNA选择设计不同长度的引物，没有一对是无found显示的，真的很让人纠结；请问文献上的引物有的也是这样吗，不完美，但能扩出来，不会影响q

这个问题很简单,扩增序列应该称为目的基因,目的基因一般都上万bp,从两头开始当然不合适.PCR扩增只能扩增出上下游引物之间的序列,因为只有引物之间的DNA双链是解链状态的.你的问题说明你对基础知识掌握