在动物DNA提取的实验中,在提取DNA过程中应如何避免大分子DNA的降解.
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/13 01:45:10
先配成98毫升加2毫升样品,在分光光度计下测OD260的波长和OD280的波长,两者相除既是
仍然以DNA链的形式存在,当然不会是染色质(能看到的时期叫染色质,那是很多链堆积形成的)链状结构不会被破坏,溶解是物理变化,物理变化是不会影响结构那个实验很有意思,可惜学校不让实践,都学过3年了,如有
从未听说2mol/L的NaCl溶液可以保持DNA稳定,只是说DNA在这个盐浓度下溶解度最大,可以除去一些杂质,但不能防止DNA降解.大分子DNA主要是由于过长,容易断裂形成小片段.所以在提取的时候操作
DNA主要存在与细胞核中血细胞中有大量的红细胞鸡的红细胞中有细胞核有大量的DNA而人和猪的红细胞中没有细胞核只有白细胞的而且数量很少所以如果用人和猪的血的话几乎提取不到DNA
这要看你要提的核酸式DNA还是RNA.首先说一下DNA吧,一,首先要用10%的SDS处理匀浆器,这样可以除去匀浆器中的污染.二,最好在冰上进行,防止降解三,要加足够的RNA酶及蛋白酶K使RNA及蛋白质
DNA不溶于95%的酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液.利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA.这里,用酒精可以洗脱在前几步实验中使DNA携带的盐离子
核酸不溶于乙醇,所以可以使用乙醇对核酸进行漂洗,使残留的杂质溶解于乙醇,并最终通过离心去除.可总结为去除DNA中的残留杂质(对混杂的RNA无效).
猪血,因猪血细胞成熟后无核,无法提到DNA.总的,哺乳动物都有这种性质,成熟血细胞都无核.
C减少DNA的溶解DNA在NaCl溶液中溶解度随NaCl浓度变化而变化在NaCl0.14mol/L时溶解度最低,故先将其溶解于高浓度NaCl溶液中在不断加蒸馏水时NaCl浓度降低从而使DNA溶解度降低
一般操作问题只会影响到浓度高低,如果根本没有,那可能试剂有问题,试剂配置?酸碱度?严格按照要求步骤来一遍.还有一步细节,分层后吸上清液时宁可少吸也不要吸到下层有机溶剂,否则Dna肯定没了
A.DNA中的嘌呤核苷酸中的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ-酮基戊醛,在沸水浴条件下,它和二苯胺试剂反应使溶液呈蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂.B再问:菜鸟一个完全不懂请解释答案再答:这个就
二苯胺在高温下可将DNA染成蓝色,达到鉴定目的
太高会破坏dna结构有可能溶解度会增加减小dna提取量是室温最好因为实验时酒精没处理
C书上有的步骤0.14盐水析出后用酒精(冷)处理可得到相对纯净的DNA
氯仿、异戊醇的作用是使蛋白质变性、膜溶解.离心后上清液中含DNA,下层沉淀中含变性蛋白、膜碎片等.
对样品进行急冻,使样品变硬,变脆,这样可以保证研磨的时候能够充分,均匀,DNA释放更充分.另外,提供一个相对低温的环境,对保证样品的稳定性也有帮助.
提取:用pcr鉴定:用吡罗红和甲基绿鉴定.
这个是不行的
可在洗脱一步上加上适量RNA酶,37℃温浴1小时.RNA是单链核酸,DNA是双链核酸.参考资料:河南惠尔纳米生物DNA事业部
以东盛生物的为例bufferP1:除去RNAbufferP2:裂解细胞bufferP3:沉淀DNAbufferWA、bufferWB:都是洗涤液(这两个之间有什么区别我也不清楚)TE:溶解DNA.