内参基因需要自己合成吗
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/10/06 08:38:20
直接在NCBI里面查找金银花的内参基因,如果没有的话,就找与金银花同种属植物的内参基因.我做过猪的,在NCBI里查不到猪的内参基因,我就用的小鼠的,因为是持家基因,所以在哺乳动物里面表达的差异不大,也
当然不一定,比如说你的目的基因的copynumber高或者PCR的效率高都会使得beta-actin的条带不如目的基因的条带亮
上下引物的Tm最好相似,不能差异太大,不然不好设计退火温度;内参条带很亮,说明RT应该没多大问题,问题可能出现在PCR上.没有目的基因是因为1该基因确实不表达;2你的引物不特意,到NCBI的Prime
可以.定量PCR内参的选择最重要的是这个基因在不同个体之间的此组织(比如是肌肉)表达恒定.所以你需要找好了.
在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧
呃,难道你不会设计引物?获取基因不需要用内参.内参是做表达分析时才用的.比如你做RT-PCR考察不同组织中HintI表达差异时才需要用内参的.
要在生物体或细胞内稳定表达的基因才能作为PCR的内参基因,因此又名看家基因,由于在不同细胞、组织中常量表达,没有组织特异性,因此不同昆虫之间可以共同使用内参.再问:那引物是根据自己的物种去具体设计还是
你先要逆转录mRNA成cDNA,然后再扩增.你上NCBI查到hint1的cDNA序列,按照5’UTR和3’UTR序列设计就可以了啊.
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大(比如3-4个CT值)那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样
如果是基因,可以通过学习制造-基因技能,里面有基因炼化,就是低级基因合成高级的.如果是说宝宝的因子,垃圾的就是垃圾了,无法通过合成获得好的.
蛋白质本身是无法自身合成的,它不具有自主复制的能力.每一种的生命活动大部分由基因控制,基因通过转录,形成mRNA,它通过核孔穿过细胞核,来到细胞质中,最后与信使RNA互上碱基互补配对的转运RNA将携带
一个或一种血红蛋白的合成不是需要几个基因,而是由几个基因控制形成的,它是由一个基因段控制的
可以鉴定出两种状态下细胞总RNA样品内A基因量的差异,但这个差异包含着误差:1,总RNA量的不准确性,虽然用分光光度计计算了浓度,但实际上还是有误差的存在,对那些表达水平只差那么丁点儿的样品尤其关键;
啥叫不同阶段只要模板不同就要检测内参标准曲线是指拿已知浓度的标准品做出来的曲线不是一个概念
这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差(比如提RNA时的损失),所以这个
好的内参基因应该受环境影响变化较小,否则不能作为对照与处理的内参.常用内参有actin,ubiquitin,histone等等,一般物种都有常用内参,不建议在这方面发挥.再问:看的文章里筛内参基因时怎
问题不大别太怪就好关键还是说话或者写文时看上下语境
应该是编码区和非编码区都有,因为人工合成的DNA可以直接复制转录翻译
一个一个查的:Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbareactin:LOC_Os03g61970Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbarealp