做转染的质粒用水洗脱还是EB
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/12 18:29:59
不知道你没杂出条带是因为什么原因,还有你杂交的抗体是目的蛋白的抗体吗?你杂杂标签蛋白试试,看看有没有条带啊?我这么说是因为,膜蛋白确实不好提取,而且提取后可能空间构想改变了,你的抗体可能识别不了了,而
只要没有整合到基因组DNA,转染进入的外源性DNA都会随着细胞分裂而被稀释.所以经过10天后表达肯定是会减弱的,这是正常现象.只有当外援DNA整合到基因组后,表达水平才能稳定
质粒丢失是很常见的现象,质粒复制速度跟不上细菌分裂速度,质粒就会丢失.
一般不应该是质粒的问题,如果你担心是反复冻融的问题,建议分装或是在4摄氏度解冻.最容易出问题的应该是转染试剂和细胞状态.不知道你用的什么转染试剂,PEI因为带正电荷,通常来说比较容易进细胞,但是毒性较
我有个室友前段时间也遇到了这种情况再答:后面找重庆威斯腾生物公司做的慢病毒,慢病毒感染后细胞死亡率低多了,效果还可以。
上清收了做ELISA细胞直接裂解提蛋白做WB
应该还有优化的潜力的,我不知道你用的什么转染试剂.转染效率本身和你用的转染试剂有很大的关系,建议你先找来集中不同的转染试剂,用VenusC1或者是VenusN1作报告质粒,找到最适合你的细胞的试剂,然
看看lipo的说明书不就知道啦以6孔板的一个孔为例吧一管200ulOPTI+5ullipo静置5分钟另一管200ulOPTI+4mg质粒两管混匀静置20分钟后加到一个孔里4-6小时后换液再问:对于29
只需要摸一下质粒浓度和转染试剂的浓度
这个问题其实不难,但是你如果样本多的话,那还是建议找外包公司做吧,重庆威斯腾生物负责整体实验外包,做了10多年了,口碑很不错.
稳转吧?顺转不用切再问:酶切后纯化时能用普通胶回收试剂盒吗再答:单切回收其实不用跑胶有一种pcr产物回收或者dna片段回收试剂盒就行不知道胶回收试剂盒能不能不跑胶直接用
这个实验可以找威斯腾做,我以前也是在那里做的,效果很好.
任何东西都可以复制
这个和你表达的蛋白有关系.如果转染后24h没有达到蛋白表达的峰值,或者呈比较低的表达量的话,做IF时可能会信号很低,有的甚至可能观察不到信号.但是有些蛋白表达时间比较早,24h就可以检测到了.如果时间
转染率是大概估计一下,有荧光的占总细胞的比率,如果要精确值可以去做流式.再问:请问具体做流式要怎样做,能说具体一点吗?转染率很低做流式会不会没效果?比如不到1%,那流式可以测出来吗?再答:你的转染目的
血渍要用冷水清洗,因血遇热会凝固,刚沾染上时,应立即用冷水清洗.去除血渍的方法:1、用冷水冲洗污渍,尽可能使污渍淡化;2、用蓝月亮洗衣液原液涂抹在污渍处,完全覆盖污渍,静置5分钟后(可轻轻搓洗),加入
博凌科为您的情况我们去年也曾遇到过.目前市面上的质粒提取试剂盒林林总总,令人难以取舍.我觉得首先应该根据自己的需要来选取.进口的试剂盒,比如qiagene,omiga,promega等固然好,但是价格
我们都买的博凌科为的,价格公道,效果好性价比高!这各品牌的产品很不错的值得信赖的的!博凌科为的产品都挺好的,很多实验室都在用,这个品牌挺值得信赖的!