-20度无水乙醇沉淀dna 时间
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/11 14:01:04
无水异丙醇工业级6000/t无水乙醇4000/t
主要是因为DNA在一定的盐浓度条件下才能更好地沉淀下来.如果你不急用其实可以沉淀过夜的.这样就可以少了75%乙醇洗涤的那一步,那一步主要是洗去多余的盐.急用的话就加吧,但是一定要用75%乙醇洗涤.
1.washbuffer中加入无水乙醇后,终浓度差不多就是70%的乙醇溶液了,在沉淀的DNA中,由于过多的盐杂质存在,影响DNA的酶切等反应,washbuffer就是洗去这些盐杂质的.2.用无水乙醇沉
可我提取的时候好像是用95%的乙醇沉淀的,而后再用70%的乙醇洗涤.1.为什么用无水乙醇沉淀DNA?用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法.乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核
二者没有什么本质区别.不过异丙醇沉淀效率高一些.用异丙醇沉淀的话等体积就可以了,用无水乙醇的话要用二倍体积去沉淀.
因为无论用哪种方法提取,沉淀DNA时总会加入高浓度的盐,加盐的目的是破坏能使蛋白质保持稳定的两个因素,使蛋白和DNA分离并沉淀下来.而此时盐的阳离子会与DNA结合形成DNA-阳离子盐溶于溶液中,再用无
用柱提取法,就是将70%乙醇加到柱子上,离心过柱,然后晾干以除去乙醇.不用柱子提取,那就是在70%乙醇中用枪头把沉淀的DNA轻轻挑起,离心管轻轻颠倒几次,离心.再问:DNA轻轻挑起,会断裂吗?离心用多
可以带滤纸放进去,没有危险,即使100度滤纸和乙醇也烧不起来.用乙醇洗过后,在漏斗里多抽一会,利用抽滤的风大致吹干,然后连滤纸抠出来,倒放在另一张大滤纸上,防止落灰,放进烘箱干燥.我也喜欢放在烘箱顶上
因为CaO和水反应生成Ca(OH)2这个反应并不完全,不像产生硫酸钡那样完全所以即使加入过量的CaO也不能保证水完全反应了因此不能用过滤法,要用蒸馏法
离心后看到沉淀没?用70%洗涤后,白色应该更加明显,要是白色沉淀没有了,那会不会是你的乙醇不是70%?还有就是,实验失败找原因很麻烦的,也很费时间的,最好,最简单的方法是按步骤重做一次.
我们当时做实验的时候没有遇冷.不过遇冷后会降低DNA的溶解度更容易提取!
看你提取的DNA是不是沉淀可以看到了.如果可以看到很明显的一片就把它轻轻的弹起来,浸泡几分钟再离心,反复2-3次即可.如果你提取的沉淀颜色很深可以早70%的乙醇中浸泡过夜(4度),第二天再漂洗1-2次
这个是要看情况的.平常我们都用异丙醇沉淀,因为它沉淀效果比较好,但是异丙醇不容易除去,要用乙醇洗,乙醇就很容易除去啦
化学药品店有买,即化学试剂店里有售哦!
不溶的不是DNA,是蛋白没洗干净跑下电泳看看DNA条带就知道提出来没了
因为硝酸根具有强氧化性,乙醇的催化氧化在有催化剂(Cu或Ag)存在的条件下,乙醇被氧化成乙醛.乙醛也极易成为乙酸,乙酸与Ag离子生成乙酸银,亦称“醋酸银”.化学式AgC2H3O2.白色有光泽针状晶体.
YouhavetothinkaboutthesolubilityofDNAinwaterandethanol.ThesurfaceofDNAishighlychargedandasaresultapo
1.DNA不溶于乙醇2.乙醇可以吸附水分子(极性相同),使得溶液中相对的水分子减少,增大了DNA在水中的相对浓度.3.附:乙醇沉淀DNA需要盐离子,用金属离子屏蔽DNA上磷酸的负电荷,降低DNA分子间
异丙醇比较疏水,能很更好地沉淀核酸,用乙醇的目的是去盐,它比异丙醇更亲水,所以能去掉一些盐离子.有时还用70%的乙醇洗样品也是为了增加盐的溶解度.在沉淀核酸时可用乙醇与异丙醇,乙醇的极性要强于异丙醇,
酚氯仿抽提DNA后,会使溶液分层,上层为水相,含有DNA;中间为蛋白(有时看不到);下层为有机相.原因是酚氯仿可以使蛋白质变性,从而从溶液中析出,但是蛋白密度会小于酚氯仿,所以离心后它分布在中间;而D