三个内参基因 几何平均数的意思
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/11 12:19:25
我也遇到过这种问题,个人觉得可能是目的基因的定量引物不好,还有就是要优化PCR条件!
当然不一定,比如说你的目的基因的copynumber高或者PCR的效率高都会使得beta-actin的条带不如目的基因的条带亮
可以.定量PCR内参的选择最重要的是这个基因在不同个体之间的此组织(比如是肌肉)表达恒定.所以你需要找好了.
这要看你内参照的意思是什么了,如果是防止假阴结果,比如PCR体系受抑制之类的,如果有内参就知道这个结果是被抑制了还是真阴性结果,这时内参探针设计非常简单,就是将目标探针中间几个点突变一下,内参引物和靶
在这个专利文件里面有全长,引物你自己设计吧
要在生物体或细胞内稳定表达的基因才能作为PCR的内参基因,因此又名看家基因,由于在不同细胞、组织中常量表达,没有组织特异性,因此不同昆虫之间可以共同使用内参.再问:那引物是根据自己的物种去具体设计还是
这个要看你在做PCR前的加样量是否一致.如果加样量是一致的,而内参做出来差别大(比如3-4个CT值)那说明你的实验体系有严重的问题.理论上加入的DNA量一样多,内参的CT值应该都一样.如果你能肯定加样
解题思路:根据不等式的性质解答解题过程:varSWOC={};SWOC.tip=false;try{SWOCX2.OpenFile("http://dayi.prcedu.com/include/re
内参的选择:普通PCR内参的大小没有多大要求,但realtime一般选择300bp以下它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时,加入的浓度可能会不一致,即使用分光广度计测其浓度,也会有仪器误差.P
可以鉴定出两种状态下细胞总RNA样品内A基因量的差异,但这个差异包含着误差:1,总RNA量的不准确性,虽然用分光光度计计算了浓度,但实际上还是有误差的存在,对那些表达水平只差那么丁点儿的样品尤其关键;
你说的应该是realtimePCR吧,注意RT其实是逆转录reversetranscription的缩写,和realtime一定要分开来.常说的qPCR,qRT-PCR,都是通过实时(realtime
提交不了答案.不要调一致把内参也检测了
1.6-kbfragmentencompassingtherp49gene,whichcodesforaribosomalprotein,hasbeenclonedandsequencedinDros
为啥要把内参调一致呢你每次都也检测一下内参不就好了然后用目的基因的比上内参一般很少有什么调一致的吧.
没有关系,可以继续按正常步骤计算.内参的CT值通常要控制在25-30,目的基因CT值高,只说明目的基因表达量比较低..没关系..
啥叫不同阶段只要模板不同就要检测内参标准曲线是指拿已知浓度的标准品做出来的曲线不是一个概念
这个概念一般是用在定量PCR中.定量PCR是要检测某个基因的表达,降低或者提高,但是当你得出结果以后,你并不知道是它本身的表达降低/提高了,还是你操作过程中造成的误差(比如提RNA时的损失),所以这个
好的内参基因应该受环境影响变化较小,否则不能作为对照与处理的内参.常用内参有actin,ubiquitin,histone等等,一般物种都有常用内参,不建议在这方面发挥.再问:看的文章里筛内参基因时怎
不同基因之间表达量差异很大,可达上千甚至上万倍之差,所以CT值差10以内属正常现象,但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因,如果目标基因和内存基因表达量(CT值差)过大,用内参基因来衡量目标基因的
一个一个查的:Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbareactin:LOC_Os03g61970Oryzasativasspjaponicacv.Nipponbarealp