一种限制酶切割目的基因时,有几个切口?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/14 03:32:05
识别序列有区别--G↓GATCC--限制酶1,2都可以切,但是--↓GATC--只能有酶2切.懂了么,就是说酶一要识别出6个碱基这样的排序才能切,但是酶二只需要识别出4个这样的排序,酶二的选择性比较低
切割的目的是将载体和目的基因进行连接用同一种限制酶切后产生的dna片段切口处相同能够连接再问:A.切割目的基因与切割运载体(如质粒)时必需用同种限制酶B.切割目的基因或运载体时一般只用一种限制酶这两个
1.只有这样才能保证切得是同一位点2.一样
1,运载体和运载体连接2,运载体和目的基因连接3,目的基因和目的基因连接
是同一种,才好配对
楼主犯了一个概念性错误.限制酶并不能切割出基因来,而只是能够识别并且各特定的核苷酸序列.如果某个基因上具有能被某种限制酶识别的核苷酸序列,那么它就能被该限制酶切割.
目的基因和载体要用同一种限制性核酸内切酶切割,不然就没法连了.用不同的限制酶切两端,防止载体自连或目的基因自连.再问:额。。。。。你怎样保证两端用不同的限制酶切。。。再答:呵呵,看来你是一个好问的学生
你说的这种情况不是不会出现,但与用同一种酶同时目的基因与运载体相比,个自相连的机会大大降低了,应该还是用不同的酶切要好一些.
限制酶切割的是相邻碱基,为了确保目的基因导入载体时顺序一样,必须用同一种酶.通俗点,切割目的基因时,将一段切下,露出两端,如果用同一种酶,就可以露出与原目的基因两端相同的碱基,达到配对,使目的基因的顺
他也可以切割质粒啊,标记基因什么的
最后是两种酶,但我们在工作实践中也常有用一种酶的时候,确实存在易环化的问题,不过后面不是还要挑克隆吗,还要鉴定,那时挑到正确的就可以了.
好处有两点:1可以有效的避免载体质粒自连,提高重组质粒的比例.2可以控制插入片段的的方向.因为单酶切的话插入的方向是随机的,而双酶切片段的插入方向是一定的.
不对,因为太绝对!一般情况下是用同一种限制性内切酶,这样暴露同样的黏性末端,然后用DNA连接酶进行连接.但是也存在不同的限制性内切酶切割形成相同的黏性末端.
应该选用有相同的切点的运载体再问:这是前提吗?再答:是条件,否则不可能成功
是的,必须的.因为同种限制酶的碱基序列相同,目的基因与运载体重组后必须用同种限制酶,它们的碱基序列才会相同.
那个08还是07的高考题里面,就可以作为一个有多个切口的例子.说实话,那个题目是一个实实在在的披着生物学小外衣的数学题, 还非常的简单查看原帖
这样可以使切割后的目的基因与质粒连接上
一定要相同.只有用同一种限制酶剪切目的基因和切割质粒,才能暴露相同的黏性末端或平末端,便于DNA连接酶的拼接
无法避免,限切酶是随机切割.再问:那用限制酶切割出的若干片段中如何确定哪一段基因是我们所需要的目的基因?除了将每段基因分别进行表达实验外有其他简便方法吗???
一般情况下是的,因为只有这样才能有相同的黏性末端,目的基因和运载体才能重组.但也有两种不同的内切酶产生相同的黏性末端如G↓ATTCG和↓ATTC.还有一种可能是,因为运载体上的基因表达是由方向的(即启